71气相和高效液相色谱测定技术.pptx

气相色谱的定义气相色谱法是采用流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。

气相色谱的原理利用试样中各组份在气相和固定液液相间的分配系数不同，当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组份就在其中的两相间进行反复多次分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同，因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，按顺序离开色谱柱进入检测器，产生的离子流讯号经放大后，在记录器上描绘出各组份的色谱峰。

气相色谱的仪器组成01－载气瓶；02－压力调节器（a－瓶压，b－输出压力）；03－净化器；04－稳压阀；05－柱前压力表；06－转子流量计；07－进样器；08－色谱柱；09－色谱柱恒温箱；10－检测器恒温箱；11－检测器；12－尾气出口；13－记录器

载气源气相色谱的流动相为气体，称为载气。常用载气：氢气、氮气。

进样部分进样方式一般可采用溶液直接进样、自动进样或顶空进样。溶液直接进样采用微量注射器、微量进样阀或有分流装置的气化室进样。

色谱柱色谱柱为填充柱或毛细管柱。

柱温箱由于柱温箱温度的波动会影响色谱分析结果的重现性，因此柱温箱精度应在±1℃，且温度波动小于每小时0.1℃。温度控制系统分为恒温和程序升温两种。

检测器适合气相色谱法的检测器有火焰离子化检测器（FID）、热导检测器（TCD）、氮磷检测器（NPD）、火焰光度检测器（FPD）、电子捕获检测器（ECD）、质谱检测器（MS）等。

数据处理系统可分为记录仪、积分仪以及计算机工作站等。

高效液相色谱的定义高效液相色谱法是采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。

高效液相色谱的原理以液体为流动相，采用高压输液系统，将流动相泵入装有固定相的色谱柱，样品通过进样器进样后，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号，从而实现对试样的分析。

高效液相色谱的仪器组成1．贮液罐（滤棒,可滤去颗粒状物质）2．高压泵（输液泵）3．进样装置4．色谱柱——分离5．检测器——分析6．废液出口或组分收集器7．记录装置

色谱柱（1）反向色谱柱（2）正向色谱柱（3）离子交换柱（4）手性色谱柱

检测器最常见检测器为紫外-可见分光检测器，包括二极管阵列检测器，其他常见的检测器有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器。

流动相反向色谱系统常用的流动相有甲醇-水系统和乙腈-水系统。正向色谱系统的流动相常用两种或两种以上的有机溶剂，如二氯甲烷和正己烷等。

高效液相色谱图的常用参数色谱图（流出曲线）：电信号强度随时间变化曲线。色谱峰：流出曲线上突起部分

高效液相色谱图的常用参数不对称因子正常峰（对称）非正常峰前沿峰拖尾峰色谱峰——fs在0.95~1.05之间——fs小于0.95——fs大于1.05

高效液相色谱图的常用参数基线、噪音和漂移基线：当没有待测组分进入检测器时，反映检测器噪音随时间变化的曲线。噪音：仪器本身所固有的，以噪音带表示（仪器越好，噪音越小）漂移：基线向某个方向稳定移动（仪器未稳定造成）。

高效液相色谱图的常用参数保留时间-定性参数保留时间tR：从进样开始到组分出现浓度极大点时所需时间，即组分通过色谱柱所需要的时间。死时间tm：不被固定相溶解或吸附的组分的保留时间（即组分在流动相中的所消耗的时间），或流动相充满柱内空隙体积占据的空间所需要的时间，又称流动相保留时间。调整保留时间tR’：组分的保留时间与死时间之差值，即组分在固定相中滞留的时间。

高效液相色谱图的常用参数峰高、峰面积-定量参数半峰宽W1/2：峰高一半处所对应的峰宽峰宽W：正态分布色谱曲线两拐点切线与基线相交的截距

色谱法测定药物含量面积归一化法：精密称取某个杂质或待测成分对照品适量，配制成适当浓度的对照品溶液，取一定量，精密加入供试品溶液中，根据外标法或内标法测定杂质或主成分含量，再扣除加入的对照品溶液含量，即得供试品溶液中某个杂质和主成分含量。

色谱法测定药物含量的方法外标法?

色谱法测定药物含量内标法??

色谱法测定药物含量标准溶液加入法按各品种项下的规定，配制供试品溶液，取一定量进样，记录色谱图。测量各峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积占总峰面积的百分率。