第三章 常见皮肤采样与检查方法.pptx

第三章常见皮肤采样以及检查方法

皮肤采样

问诊

病程：病初期动物的表现；用过什么药，用药后症状逐步减轻还是继续加重；犬猫生活的环境，有无地毯、垫子，是否常去草地戏耍；有无接触过病狗、猫；用什么洗发液，如何使用洗发液以及洗澡的方式和次数；犬猫哪个部位皮肤有病损，是否瘙痒等。

病史：是否患过螨虫感染、真菌感染；是否处于分娩后期；有无药物过敏史、接触性皮炎史和传染病史。

皮肤病采样前准备

了解患病动物的病史：

包括性别、年龄、是否绝育、皮肤瘙痒程度、持续时间、病变部位、临床症状、有无季节性、食物种类、生活环境、用药史、用药时间等。

观察皮肤的整体印象，包括：皮肤及被毛干燥、油腻、易掉毛、气味等

观察有无跳蚤、跳蚤排泄物、虱子、蜱等

与主人沟通，了解有无新生的患处，瘙痒最严重部位等，最好刮取新生病变与健康皮肤交界处，取2-3处病变局部剪毛，采样。

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采样工具的准备

剪毛剪1把、手术刀2把（钝刀片）、止血钳一把、载玻片、盖玻片、碘酒棉球、酒精棉球

在载玻片上分两点各滴上一滴50%甘油（主要查看螨虫类）和10%KOH（主要查看真菌类）备用

干净的载玻片备用（主要查看细胞、细菌类）

根据采样方法还可选择胶带、伍德氏灯等

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刮片法流程

刮片法：适用于检查疥螨、皮肤癣菌等

采样的处局部剪毛（剪毛部要大于要刮取的病变部）

用手术刀轻轻刮取新患部与健康皮肤交界处

（1）其中一把手术刀刮取皮肤表层皮屑置于事先准备好的10%KOH中（起到透明化作用）备用，主要查看真菌

（2）表层刮取后，用手挤压其患部，并用另一把手术刀将挤压处毛囊内的皮肤表层下刮取物置于事先准备好的50%甘油中（起到固定和透明化作用）备用，主要查看螨虫

在另一患处做同样的取样，分别将刮取物置于载玻片上相应的溶液中

取盖玻片分别将刮取物轻轻按压，尽量使刮取物与溶液混匀

采样结束后，在采样部位涂擦碘酒消毒

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拔毛法流程

拔毛法：适用于查看外寄生虫、蠕形螨、皮肤癣菌，毛发形态等

在病变处用止血钳拔出少量毛发（连同毛根拔出），置于KOH中/甘油中备用

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挤压法流程

挤压法：适用于查看蠕形螨

在病变部位，以拇指和食指捏起皮肤，用力挤，使毛囊扩张，用刀片刮取经挤压毛囊液置于甘油中备用

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胶带法流程

胶带法：适用于查看外寄生虫、癣菌、细菌、细胞学

选择合适的透明胶带，在患病处皮肤上粘取一些皮屑和组织碎片，粘置于载玻片上备用

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抹片法流程

抹片法：适用于查看细菌，癣菌，细胞学等

在用刀片浅层刮取后，直接用载玻片于皮肤上按压，尽量较均匀涂满玻片，火焰固定或自然晾干备用

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检查方法

一、放大镜法与湿纸试验

放大镜观察：手持放大镜，靠近原发病变处进行详细检查，不能完全鉴别体表寄生虫的种类，如虱子、跳蚤、姬螯螨等。

跳蚤湿纸试验：收集用跳蚤梳或硬塑料梳子梳理下的碎屑，放在潮湿的白纸上，黑色的跳蚤粪便会将湿纸染红（跳蚤粪便含有可溶性血色素）。

二、伍德氏灯检查法

伍德氏灯：适用于查看部分小孢子属的癣菌感染

用手提式伍德氏灯在暗室内开启灯光，预热5-10分钟，光源与皮肤距离约5-10cm左右，光线对准被检处，观察有无荧光出现

三、显微镜检查法

1、毛发镜检

将毛发用透明胶带贴在玻片上，或滴加石蜡油上进行观察。

a、毛尖，是否正常，有无断裂或受损迹象。

b、检查毛根，评估是出于生长期还是终止期。记录生长期和终止期的数量。以及主毛和次毛的数量。当拔出的毛根有包囊物时，也有可能检出粉刺和毛囊管型；拔毛还可检出蠕形螨

2、微生物镜检

将皮肤刮片、直接压片、透明胶带、耳道分泌物、细针抽吸等方法获得的样品直接进行显微镜检查，或者通过染色干燥后置于显微镜下检查，以对病情进行详细诊断。

四、微生物培养法

1、细菌培养：主要用于细菌培养鉴定和药物敏感试验较多。常用培养基：

2、真菌培养：主要用于筛查无症状的癣菌感染病，或评估经过治疗感染是否清除。所用培养基：沙氏葡萄糖琼脂。

培养基变成黄橙色

五、PCR技术

PCR技术是模拟体内DNA的天然复制过程，在体外扩增DNA的一种分子生物技术。

六、免疫染色技术

包括：免疫荧光、免疫组化。

直接将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。

七、玻片压诊法

选择压诊法是选择透明洁净的载玻片或者透明特制的压舌板，按压于皮损出处，以观察皮疹颜色的改变，是一种皮肤病的辅助诊断方法。

八、过敏测试

1、血清免疫球蛋白E试验（IgE试验）

变态反应性疾病与血清免疫球蛋白E（IgE）密切相关。过敏反应时，IgE就会升高，IgE可以促发、推进I型变态反应，因此检测血清中的总Ig