第三章 病毒和亚病毒-推荐.ppt

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单链RNA又有正极性和负极性之分 正极性:指单链病毒RNA可以作为mRNA直接进行翻译,称该RNA为正极性RNA。(+RNA) 负极性:病毒SSRNA的核苷酸序列和其mRNA序列互补,称其为负极性RNA。(-RNA) 双意RNA:部分为正极性,部分为负极性的RNA。 注:DNA也有相同情况。(以其序列和mRNA是否相同为准) 一步生长曲线(one-step growth curve ) 定量描述烈性噬菌体增殖规律的的实验曲线。 2 组成 潜伏期(latent phase) 噬菌体核酸侵入宿主cell后,到第一个成熟phage粒子装配前的一段时间。 裂解期(rise phase) 潜伏期后,宿主cell迅速裂解,使得溶液中phage粒子数目急剧增多的一段时间。 平稳期(plateau) 宿主cell全部裂解,溶液中phage数目达到最高值的时期。 注: 由一步生长曲线可获得病毒繁殖的两个特征性数据,分别是潜伏期和裂解量。 裂解量: 在平稳期中,每一宿主细胞所释放的平均噬菌体的粒子数。 裂解量=平稳期噬菌体效价/潜伏期噬菌体效价 1 具体操作: 高浓度的敏感菌与一定稀释度的噬菌体(10︰1)混合。 经数分钟吸附后,加入适量的相应抗血清,中和尚未吸附的游离噬菌体。 将培养液高倍稀释,终止抗血清的作用。随即置于适宜温度下培养; 每隔数分钟取样,连续测定效价:0.5mL与0.5mL敏感菌悬液混合,稍后与5mL半固体培养基混匀,37℃培养,观察测定噬菌斑数。 绘制一步生长曲线(以感染时间为横坐标,噬菌斑数为纵坐标)。 温和噬菌体和溶源菌 相关概念 烈性噬菌体(virulent phage):侵入宿主细胞后短时间内引起细胞裂解的噬菌体。 温和噬菌体(temperate phage):侵入宿主细胞后,将自身的基因组整合在细胞核DNA上,并随核DNA复制传给子细胞的噬菌体。(核酸都是dsDNA ) 注:温和噬菌体也有少数是以质粒形式存在于宿主细胞中。如E.coliP1噬菌体。 前噬菌体(prophage):处于整合状态或以质粒形式存在的温和噬菌体基因组。 溶源菌(lysogenic bacteria):带有前噬菌体的细菌细胞。 温和噬菌体三种存在形式: 游离噬菌体(游离态):成熟后被释放并有侵染性的游离噬菌体粒子; 前/原噬菌体(整合态): 营养噬菌体(营养态):原噬菌体经理化因素诱导后,脱离宿主核基因组而处于积极复制、合成与装配状态的噬菌体。 溶源菌的特性(6个): 溶源性可遗传: 溶源菌可(自发或诱发)裂解 溶源菌具免疫性:溶源菌对于同一类型噬菌体有免疫性。 复愈:经辐射或氮芥处理后活下来的细菌中,有些会失去原噬菌体,称复愈。 溶源转变(lysogenic conversion) :由于噬菌体DNA整合到宿主细胞染色体上,使得溶源菌获得除免疫性以外新的性状。例:白喉棒杆菌被温和噬菌体感染后,可分泌白喉毒素。 局限性转导:整合的噬菌体脱离核染色体时,可以将该菌个别临近DNA转移到另一个细菌的现象。 溶源性细菌的检出 用紫外线照射待测菌株; 将少量溶源菌和大量敏感菌混合在琼脂培养基中,进行倒平板培养,观察。 如是溶源菌,个别细胞会发生自发裂解的溶源性细菌时,可出现独特噬菌斑。 动物病毒的繁殖 动物病毒可引起许多人类疾病如流行性感冒、肝炎、疱疹、流行性乙型脑炎、狂犬病、艾滋病、非典型肺炎(由 SARS 病毒引起)等。 在已发现的动物病毒中约有 1/4 的病毒具有致肿瘤作用,至少有 5 类病毒(乳头瘤病毒、反转录病毒、疱疹病毒、肝DNA病毒和黄病毒)与癌症发病有关。 畜、禽等动物的病毒病也极其普遍,如猪瘟、牛瘟、口蹄疫、鸡瘟、鸡新城疫和劳氏肉瘤等,许多还是人兽共患病,且危害严重。 动物病毒属于大多呈球状,含有单链或双链的 DNA 或 RNA 。有些是有包膜的,有些无包膜(裸露的),大小差异很大。 人类乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是一种嗜上皮性病毒,在人和动物中分布广泛,有高度的特异性。 已知HPV可引起人类良性的肿瘤和疣。我国妇女85%宫颈癌就是由HPV的16型和18型诱发的。 如生长在生殖器官附近皮肤和粘膜上的人类寻常疣、尖锐湿疣以及生长在粘膜上的乳头状瘤 黄病毒 黄病毒属(Flavircls)是一大群具有包膜的单正链RNA病毒。 该类病毒通过吸血的节肢动物(蚊、蜱、白蛉等)传播而引起感染。过去曾归类为虫媒病毒。 在我国主要流行的黄病毒有乙型脑炎病毒、森林脑炎病毒和登革热病毒。 动物病毒侵入寄主细胞后可引起 4 种结果 植物病毒的增殖 植物病毒大多是单链 RNA 病毒。 从病毒粒子的形态来看基本上有三种类型:杆状、线状或近球形的多面体。有些植物病毒也具包膜。 无专门的

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