不同起始时间超数排卵处理的昆白小鼠排卵、受精和胚胎发育时程研究.pdfVIP

Onlinesystem：http：／／www．jabiotech．org 农 业 生 物 技 术 学 报 JournalofAgriculturalBiotechnol0gy 2014，22(9)：1097—1105 DOl：10．3969／i．issn．1674．7968．2014．09．006 动物干细胞与胚胎工程专题 AnimalStem CellsandEmbryoEngineering 不同起始时间超数排卵处理的昆白小鼠排卵、受精和胚胎发育时程研究 刘晓坤 张骏鸿 魏强 朱娜 赵晓娥 马保华 西北农林科技大学动物医学院 ／农业部动物生物技术重点实验室，杨凌 712100 通讯作者，mabh@nwsuaf．edu．cn 摘 要 超数排卵技术是获得大量卵母细胞、受精卵或不同发育阶段胚胎的主要手段之一。本研究选择 发情前期昆白系小~(Musmusculus)，分别在超排当天的12：00、16：00、20：00和24：00，腹腔注射孕马血清 促性腺激素(PMSG)，48h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)，随即以1：1的比例与单笼饲养的公鼠 合笼过夜，并于次 日清晨检查配种情况。超排小鼠卵母细胞、受精卵和胚胎回收结果表明，在 12：00、 16：00、20：00和24：00注射PMSG开始超排的小鼠，获取输卵管卵母细胞的适宜时间分别为注射hCG后 l6．23、14．02、15．93和 12．98h；获取受精卵的适宜时间分别为24．62、23．60、26．53和20．03h；获取卵裂胚 胎的适宜时间分别为42．76、42．39、41．85和4O．47h；获取4一细胞胚胎的适宜时间分别为56．87、57．84、57_31 和56．92h；获取8一细胞胚胎的适宜时间分别为66．89、67．39、66．20和66．07h；获取桑椹胚的适宜时间分别 为76．31、76．21、76．29和75．11h；获取囊胚的适宜时间分别为 100．65、97．14、93．91和96．86h；获取孵化囊 胚的适宜时间分别为 114．57、112．34、112．11和110．28h。在本研究选择的不同时间注射PMSG进行小鼠 超排时，超排小鼠的排卵、受精和早期胚胎发育时程基本一致；通过调整超排处理开始时间，可调整超排 小 鼠卵母细胞、受精卵和不同发育阶段胚胎的回收时间；可 以根据不同研究对小鼠卵母细胞、受精卵或不 同发育阶段胚胎的需要，合理安排小 鼠超排起始时间。本研究为以小鼠卵母细胞、受精卵或不同发育阶 段胚胎为研究材料的相关研究提供 了技术支撑 。 关键词 时程，卵母细胞，胚胎，超数排卵，小鼠 Ovulation， Fertilization and Embryonic Development Course of SuperovulatedKunmingMouse(Musmusculus)atDifferentStartingTime LIUXiao—Kun ZHANGJun—Hong WEIQiang ZHUNa ZHA0Xiao—E MABao—Hua CollegeofAnimalVeterinaryMedicine，No~hwestAgricultureandForestryUniversity ／KeyLaboratoryofAnimalBiotechnology,M inistryof Agriculture，Yangling712100，China Correspondingauthor,mabh@nwsuaf．edu．cn Abstract Superovulation isoneof importantmethodsforobtaining oocytes，zygotesand embryosof differentdevelopmentalstages．Inordertoinvestigatetheeffectofsuperovulationatdifferentstartingtimeon courseofovulation，fertilizationandembryonicdevelopment，Kunmingmouse(Musmusculus)inproestrus weresuperovulatedbyinjectingpregnantmareseru