热休克蛋白参与NF—κB介导的H2O2预处理的细胞保护作用.pdfVIP

维普资讯 420 解剖学研究2007年第 29卷第 6期 AnatRes，2007，Vol29．No．6 · 论 著 热休克蛋白参与NF—KB介导的H2O2预处理 的细胞保护作用 张 梅 郭瑞鲜 。 莫利球 崔 宇 刘 微 - 陈培熹 - 冯鉴强- (广州医学院广州蛇毒研究所，广东 广州 510082) 摘【要】 目的 探讨热休克蛋白(HSP)是否参与核因子一KB(NF—KB)介导的H20预处理的细胞保护作用。方法 应 用碘化丙啶(PI)染色流式细胞技术 (FCM)检测细胞凋亡率，免疫印迹法 (Westernblot)测定 NF—KB的表达水平．免疫细胞 化学染色法测定 NF—KB的核转移。结果 100p~mol／LH20预处理 PC12细胞 90min可显著地抑制 300I~mol／LH0 引起 的细胞凋亡 ，并可明显地上调 PC12细胞 NF—KB的表达及促进 NF—KB的核转移 ，同时也能上调 HSP70和HSP90的表达 NF—KB的抑制剂TPCK阻断NF—KB表达，并显著地阻断H20预处理的细胞保护作用及 HSP70和 HSP90的表达 结论 HSP70和HSP90参与NF—KB介导的H20预处理的适应性细胞保护作用。 【关键词】 热休克蛋白； 过氧化氢； 预处理； 核因子一．cB； 细胞保护 Heatshock proteinswereinvolved in theadaptivecytoprotection ofH202preconditioningmediated by nuclearfactor-KB ZHANG Mei，GUO Rui—xian，MO Li—qiu，CUIYu，LIU Wei， CHEN Pei—xi， FENG Jian—qiang．GuanghzhouResearch InstituteofSnakeVenom，GuangzhouMedwdCollege，Guangzhou510082China A【bstract】 Objective Toinvestigatewhetherheatshockproteins(HSPs)wereinvolvedinthecytoprotectionofH202 preconditioningmediatedbyNuclearfactor—KB (NF—KB)．Methods Thepercentofapoptoticcellswasmeasuredbypropidium iodidestainflow cytometry (FCM)， thelevelofNF—KB expressionwasdetectedbyWestern blotassay． andthenuclear translocation ofNF—KB p65wasassessed by immuno—cytochemicalstaining． Results Thepreconditioning ofH2O2at100 M markedly reduced PC 12 cells apoptosisinduced by 300 I~mol／L H202， and significantly enhanced expression and nuclear translocation ofNF—KB p65．Furthermore，100 I~mol／L H202preconditioningalsoup—regulated expression ofHSP70 and HSP90． N—tosyl—L—phenylalaninechloromethylketone(TPC K)，aninhibitorofNF—KBblockedtheoverexpressionofNF—KB，HSP70and HSP90 induced by H2O2preconditioning， accompanied with attenuation of H202