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卷 期 生 物 工 程 学 报
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非特异性脂质转移蛋白突变体的构建及在两种硫氧还
蛋白表达载体中的表达比较
"
葛晓春 陈继超 王文漪 曹凯鸣 孙崇荣
（复旦大学生命科学学院生物化学系 上海 #$$6%% ）
摘 要 对水稻非特异性脂质转移蛋白（ ， ） 中结构重要的 个氨基酸位点
*’BC3.<D<. (<C<E F-,?BD3- C-’F3<? ?BG2H G2H!!$ 5
进行了定点突变，测序结果证实了突变体构建成功。在尝试了多种大肠杆菌表达系统进行表达之后，发现硫氧还
蛋白融合表达载体适合于 野生型及突变体的表达。将编码野生型 及突变体 ， ， ，
G2H!!$ G2H!!$ I!1J H1#G K64J
， 蛋白的 顺序克隆进两种硫氧还蛋白表达载体并对其表达情况进行了比较： 载体可以在宿
L65J M5$J .L*J C2-87>B
主菌 中以较低水平表达野生型 及突变体 ， ， 融合蛋白，但不能表达 和 融合
NO1#6 G2H!!$ I!1J H1#G K64J L65J M5$J
蛋白； （ ）载体可以在宿主菌 （ ） R 中以可溶蛋白的形式表达野生型及所有突变型融合蛋白，且
C:2%#, P QG#! L:% F-8Q
表达量比在 载体 突主菌中表达量高。对 （ ）载体中表达的 融合蛋白进行了纯化，并
C2-87>B S NO1#6 C:2%#, P G2H!!$
利用带有荧光标记的脂肪酸分子对其测活，结果表明表达的野生型G2H!!$ 分子具有结合脂质的活性。
关键词 *BG2H，定点突变，硫氧还蛋白融合表达载体，荧光标记脂质
中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ）
T1"4 J !$$$0%$4! #$$# $#0$!410$5
非特异性脂质转移蛋白（ 本文的研究结果为进一步揭示 结构和功能的
*’?BC3.<D<. (<C<E F-,?BD3- ?BG2H
， ）是植物体内一类碱性、分子量较小、富 关系提供了基础。
C-’F3<? ?BG2H
含 的蛋白质，它含有
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