蛋白质组学研究中的液相色谱生物质谱及mascot原理与应用.pdf

蛋白质组学研究中的液相色谱、 生物质谱及Mascot原理与应用 生物质谱原理与仪器类型 色谱分离原理及应用 液质联用技术应用实例 Mascot 与质谱数据分析 生物质谱原理与仪器类型 色谱分离原理及应用 液质联用技术应用实例 Mascot 与质谱数据分析 质谱的基本概念 一、质谱(Mass Spectromety)是什么？ 一、质谱( 是什么？ 特殊的天平：称量离子的质量。 质谱学：是一门研究气相离子结构、 性质及反应行为的科学。 二、质谱能做什么？ 二、质谱能做什么？ 定性：化合物的结构 定量：混合物的组成 领域：化学、生物学、医学、药学、 254.2 环境、物理、材料、能源等 100 507.3 三、质谱的独到之处是什么？ 三、质谱的独到之处是什么？ 4S特性：Sensitivity 灵敏 % Speed 快速 334.3 194.2 Specificity 特异 399.7 Stoichiometry 化学计量 0 m/z 100 200 300 400 500 600 质谱学的发展历史 质谱学领域的诺贝尔奖 1906年：物理奖 J. I. Thomson 贡献：正电荷离子束在磁场中的偏转⇒ 磁质谱仪的基 础同位素分析 1989年：物理奖 W. Paul 贡献：离子阱技术的发明 2002年：化学奖 J. B. Fenn Virginia Commonwealth University, USA 贡献：电喷雾(ESI) 电离方法 生物大分子分析 Electrospray Ionization for Mass Spectrometry of Large Biomolecules, J. B. Fenn, M. Mann, C. K. Meng, S. F. Wong and C. M. Whitehouse, Science 246, 64 (1989) Koichi Tanaka ( 田中耕一) Shimadzu Corporation,Japan 贡献：基质辅助激光解吸(MALDI) 电离方法 生物大分子分析 Rapid Communications in Mass Spectrometry 2, 151 - 153 (1988), Koichi Tanaka, Hiroaki Waki, Yutaka Ido, Satoshi Akita, Yoshikazu 质谱仪的主要构成 • 离子源 • 质量分析器 • 检测器 • 离子光学系统 • 真空系统 离子源 ESI (Electrospray Ionization ) 电喷雾电离 • Nano ESI • 特点：能与HPLC很好地在线联用 • 翻译后修饰分析 • 多电荷 MALDI (matrix assisted laser desorption ionization )基 质辅助激光