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肾病综合征患者血清肽谱的差异性研究 研究生：张 岳 导师：刘华英 副教授 眭维国 主任医师 戴 勇 教授 专 业：生物化学与分子生物学 研究方向：重大疾病机理研究 年级：2007 级 摘 要 肾病综合征（nephrotic syndrome，NS）是多种病因所致肾小球基底膜通透性增高， 使大量血浆蛋白由尿中丢失而导致的一种综合症，以大量蛋白尿、低蛋白血症、水肿、高 脂血症为其临床特点，常见并发症有感染、血栓形成、急性肾衰、肾小管功能减退、钙代 谢异常以及内分泌失调等。目前，NS病理类型的明确诊断主要依靠肾活检，而肾活检是一 项有创性检查，缺乏灵敏性和特异性。因此，寻找特异、敏感的生物标记对于早期鉴别NS 的病因和病理类型具有重要的意义。蛋白质组学是一门新近发展的学科，可用于检测与疾 病早期诊断有关的特异生物标记，并对疾病的治疗及预后作出评价。 目的：本研究采用了一种新的技术平台ClinProt，该技术平台包含了以反向磁珠为基础的 样本制备和以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）为采集生物信息的手 段，研究NS患者血清蛋白质谱的差异性，尝试探索指示NS的生物标记。 方法：本实验分为实验组和对照组两个大组，通过ClinProt磁珠浓缩和MALDI-TOF MS分析 NS患者的血清蛋白资料，实验组为经肾活检确诊的49例NS患者，包括17例肾小球膜增生性 肾小球肾炎（MsPGN）、12例微小病变性肾病（MCNS）、10例膜性肾病（MN）和10例局灶 性节段性肾小球硬化症（FSGS），对照组为10例健康志愿者。 结果：与健康对照组比较，MsPGN组、MCNS组、MN组、FSGS组分别筛选出5个、7个、6个、 5个显著表达的差异性多肽。组间比较采用t检验，P＜0.05有统计学意义。运用遗传分类 算法，建立了NS的分类模型，该模型对MsPGN、MCNS、MN和FSGS的交叉验证能力分别为 96.18%、100%、98.53%和94.12%，识别率均为100%. 结论：基于功能性磁珠的样本分离法结合MALDI-TOF MS分析的实验方法是精确而稳定的。 作为一项前瞻性的工作，本研究采用蛋白质组学的手段对NS作出早期诊断，为人们从蛋白 质组学的层面更好地理解NS的发病机理提供一个崭新的视角。 关键词：肾病综合征，血清肽谱，ClinProt技术平台，磁珠，早期诊断 Variabilities of serum peptidomics spectra in patients with nephrotic sydrome M.D. candidate: Yue Zhang Supervisor: Huaying Liu Weiguo Sui Yong Dai Major: Biochemistry and Molecular Biology Research Orientation: Major Diseases Mechanism Grade: 2007 Abstract Nephrotic syndrome (NS) can be caused by one or more different diseases which can increase the permeability of glomerular basement membrane (GBM) and induce massive plasma proteins are lost. NS is not a single disease but a syndrome which is a set of symptoms and signs that tend to occur together. NS is characterized by massive proteinuria, which leads to hypoproteinemia, hyperlipidemia with ele