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中文摘要
脑缺血对大鼠脑微血管内皮细胞的损伤机制及
黄体酮的保护作用
博士研究生:赵源征
导 师:王建平教授
郑州大学第五附属医院神经内科
河南郑州450052
缺血性脑血管病是威胁人类健康的主要疾病之一。脑缺血后继发脑水肿、
颅内压增高甚至脑疝形成是致残、致死的重要原因。
脑水肿形成的解剖学基础是血脑屏障完整性的破坏,血管内水分进入脑组
microvascularendothelial
织。而脑微血管内皮细胞(brain cell,BMEC)是血脑
屏障的最重要组成部分。BMEC的紧密连接与细胞外基质、星形胶质细胞终足
一起,构成了血脑屏障的主要结构基础。BMEC不仅参与构成血脑屏障,而且
多种生物活性物质由BMEC产生及分泌,这些物质具有调节血管张力、血液流
动性和粘附性等功能,对维持币常血液循环至关重要。BMEC损伤是脑血管病
特别是缺血性脑血管病的早期病变和摹本动因,与脑血管病发生发展密切相关,
因此保护BMEC的结构和功能完整显得尤为重要。
目前,对脑缺血损伤机制的研究主要集中在氧自由基、兴奋性氨基酸、细
胞内钙超载、线粒体的损伤、炎症反应和细胞凋亡等方面。其中,缺血后的炎
症反应尤为重要,它能促进继发性脑损害,加重脑损伤,是脑缺血损伤的主要
B(nuclear
原因之一。活化的BMEC在转录因子,特别是核转录因子.r
B,NF.石B)系统的调节下,产生一系列细胞因子,如细胞问粘附
factor-kappa
adhesionmolecule—l,ICAM.1)、血管细胞粘附分子.1
分子.1(intercellular
中文摘要
(vascularcelladhesionmolecule.1,
VCAM.1),这些因子介导或直接参与白细
胞和BMEC的粘附,进而帮助其跨越BMEC,浸润至缺血脑组织。
流行病学调查结果显示,女性(尤其是绝经前)的缺血性脑血管病发病率
远低于男性,而绝经后的发病率则显著上升。另外绝经后女性的失H民、焦虑等
神经系统表现明显增多。据此认为,雌孕激素可能参与了脑血管病的发生和发
展。国内对黄体酮神经系统作用的研究开展较少;国外研究多局限于外周神经
损伤、脑外伤等领域,对黄体酮脑缺血保护作用机制的研究则处于起步阶段,
特别是对其保护血脑屏障、减轻缺血后微血管内皮细胞损伤机制的研究尚未见
报道。
第一部分 体外构建大鼠脑微血管内皮细胞氧糖剥夺模型
及黄体酮的保护作用
目的:体外研究氧糖剥夺对大鼠脑微血管内皮细胞的损伤机制及黄体酮的保护
作用,以探讨黄体酮保护血脑屏障的可能机制。
and
方法:体外培养大鼠脑微血管内皮细胞(BMEC),并构建氧糖剥夺(oxygen
glucose
VCAM.1的表达情况。利用Westernblot方法检测大鼠BMEC氧糖剥夺后核蛋白
NF—tcB
assay
p65亚基含量,染色质免疫沉淀分析(Chromatinimmunoprecipitation
应激损伤水平,利用生物化学法测定细胞培养液中及细胞内丙二醛
dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH—Px)
活性。
中文摘要
体酮对此有明显抑制作用。氧糖剥夺能显著提高NF.rB的DNA结合活性。黄
体酮对此有明显抑制作用。OGD6h明显降低BMEC的存活率,并增加LDH
释放率。OGD6h可明显增加BMEC培养基中及细胞内MDA含量,
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