铁和alpha突触核蛋白在MPTP制备的PD小鼠模型SN选择性损伤中的作用的研究.pdf

损伤中的作用研究 摘 要 帕金森病(Parkinson’Sdisease，PD)是一种多发于中老年人群的中枢神经系 统退行性疾病，其临床表现为静止性震颤、肌强直、运动迟缓、姿势步态异常等。 PD的主要组织病理学特征为黑质(substantia bodies，LBs)形成。研究发现 能神经元变性缺失和残存细胞内路易小体(Lewy PD病人DA能神经元的变性缺失主要发生于SN，而其他含DA能神经元的区域 如中脑腹侧被盖区(ventral area，VTA)的DA能神经元受累较轻，此 tegmelltal 现象在各种PD动物模型中也得到证实。1．甲基．4苯基．1，2，3，6．四氢吡啶 典药物， 其在体内的代谢产物为1．甲基4．苯基吡啶阳离子 ion，MPP+)，研究发现并不是因为不同部位的细胞 (1-methyl．4．phenylpyridinium 对MPP+的吸收不同，而是因为不同部位的DA能神经元对毒性物质的反应不同， 但SN选择性损伤的机制仍不十分清楚。为探讨PD中SN区DA能神经元选择 性损伤的原因，本实验采用MPTP制备的PD小鼠模型，应用免疫组织化学染色、 铁染色及电镜等方法观察了MPTP处理后SN区和VTA区铁水平的变化、铁转 入蛋白二价金属离子转运蛋白l(divalentmetal1，DMTl)和铁转出蛋 transporter 白ferroportinl(FP1)的表达变化以及alpha-突触核蛋白的聚集情况及其表达水 平变化，阐明了铁和alpha．突触核蛋白与SN区DA能神经元的选择性损伤具有 相关性。 实验结果如下： 1．MPTP处理组与对照组相比，SN区TH免疫组织化学染色阳性细胞数较对照 阳性细胞数未见明显变化。 2．应用Perls’铁染色的方法观察了MPTP处理后铁染色阳性细胞数的变化，结 果显示MPTP组SN区铁染色阳性细胞数较正常组增加了163％，差别有统计 学意义(氏0．05)，而V，rA区未见明显变化。 组相比分别增多了49％和41％，差别有统计学意义(尸O．05)，而ⅥrA区 DMTI+IRE、DMTl--IRE的阳性细胞数与对照组相比未见明显变化。 4．MPTP处理组SN区FPl免疫组织化学染色阳性细胞数较对照组减少了40％， 差别有统计学意义(PO．05)，而VTA区FPl免疫组织化学染色阳性细胞数较 对照组未见明显变化。 5．电镜下观察到MPTP处理组alpha-突触核蛋白聚集体主要存在于SN区，且主 要存在于细胞核周围，呈颗粒状或者团块状，与溶酶体共同存在；在SN区轴突 内也发现了alpha-突触核蛋白的聚集体，而MPTP处理组VTA区未见明显聚集 体。 6．MPTP处理组SN区alpha．突触核蛋白免疫组织化学染色阳性细胞数较对照组 触核蛋白免疫组织化学染色阳性细胞数较正常对照组未见明显变化。 通过以上研究，证实了MPTP制备的PD小鼠模型的黑质区的TH免疫组织 化学染色阳性细胞数与对照组相比明显减少，铁染色阳性细胞数明显增高，铁转 实了alpha-突触核蛋白在黑质选择性聚集而VTA区未见明显变化。以上结果提 示铁水平、DMTl和FPI的不同表达调控及alpha．突触核蛋白的选择性聚集与 SN区和VrA区DA能神经元的不同易损性之间存在相关性。 硕士研究生：吕占云(神经生物学) 指导教师：谢俊霞教授 关键词：铁；二价金属离子转运蛋白1；ferroportin1；alpha一突触 核蛋白：帕金森病 Ironand correlatewiththeselective of alpha—synuclein degeneration inMPTP—inducedPDmousemodels neurons nigradopaminergic