第五章消毒与灭菌技术.doc-武汉职业技术学院精品课程展示.docVIP

武汉职业技术学院教案 课程名称：应用微生物技术 授课教师 授课日期 授课班级 课 题 划 时 教 学 的 求 2.熟悉常用物理和化学消毒灭菌法的原理、方法和指标。 3. 了解影响消毒灭菌效果的因素 重 点 点 2. 消毒、灭菌、防腐操作方法的掌握。 难点：1.湿热与干热灭菌效果的比较。 2.高温蒸汽灭菌时空气的影响。 3.如何综合考虑对消毒、灭菌、防腐效果的影响因素。 重难点解析 结合实验分析湿热与干热灭菌条件，比较两者的效果。通过让学生设计具体灭菌对象的措施使之在应用中综合考虑对消毒、灭菌、防腐效果的影响因素。 授 课 法 推荐作业 P165 4.5.6.7 教 学 后 记 在教学过程中以自学为主，就具体需要灭菌对象进行课堂讨论，激发学生的兴趣。 教学内容： 学习思路导引：本章需要掌握的基本技能是如何控制微生物生长的消毒、防腐与灭菌基本原理和操作方法。首先解决以下几个问题： 消毒、灭菌、防腐、无菌概念消毒、灭菌、防腐、无菌概念 消毒：指杀死病原微生物，但不包括芽胞。 灭菌：是指杀灭物体上所有微生物，包括繁殖体和芽胞。 防腐：是指防止或抑制微生物生长繁殖。 消毒剂：高浓度 防腐剂：低浓度 化疗 ： 化疗即化学治疗，是利用对病原菌具高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，以达到治疗该宿主所染疾病的方法。 无菌：物品中没有活的微生物存在。 无菌技术：是指在进行外科手术或分离、转种及培养时防止其他微生物污染实验材料的操作方法。无菌操作所用的器具和材料，都必须先经灭菌处理。 二、物理消毒灭菌的常用方法有那些？ ????????????????热力灭菌法：高温、低温、干燥 ????????????????辐射杀菌法：电离、非电离??????????????????????????? 物理学方法? 滤过除菌法 ????????????????超声波杀菌法 等离子体 渗透压 （一）、热力灭菌法 分类：干热灭菌法 ????? 湿热灭菌法 1.干热灭菌法 ? A 焚烧： ? B 烧灼： ? C 干烤：160°～180℃，2h ? D 红外线灭菌： 2.湿热灭菌法 ? A 巴氏消毒法： ??? 61.1-62.8℃，30 min ??? 71.7℃，15-30sec ? B 煮沸消毒法： ??? 100℃，5min -10min ? C 流通蒸气消毒法： ??? 100℃，15-30min??? ? D 间歇蒸汽灭菌法： ??? 100℃，15-30min，37℃过夜（3次）? E 高压蒸气灭菌法: 15磅（121.3℃），15-30min 湿热比干热灭菌好的原因： 1 细菌蛋白质在有水的情况下易于凝固变性 2 湿热穿透力强 3 湿热蒸气有潜热存在，水蒸气凝固成水释放潜热，迅速提高被灭菌物体的温度 （二）、光线与射线的消毒作用 1 日光与紫外线 　机理：损坏DNA构型-细菌死亡或变异 ? 特点：穿透力弱 2 电离辐射：包括X射线和γ射线 ? 机制：干扰DNA的合成；破坏细胞膜；产生过氧化氢等? ? 特点：穿透力强，不升高温度 （三）、滤过除菌法?? ? 用滤菌器除去液体及空气中的细菌 ? 用于不耐热的血清、毒素、抗生素 （四）、超声波的消毒作用 ? 可裂解细菌，尤其对G+更敏感??????????? ? 主要用于粉碎细胞，提取细胞组分或制备抗原等 （五）等离子体法 对微生物有良好的杀灭作用。 但不适用于纺织品和液体。 三、化学消毒灭菌的常用方法有那些？ 消毒剂 防腐剂 化学方法 化学治疗剂 ?（一）化学消毒灭菌的机制 ① 使菌体蛋白质变性或凝固 ??② 破坏或改变蛋白质与核酸功能基团 ? ③ 改变细胞壁的通透性 （二）常用消毒剂的主要种类、浓度及用途 1 酚类： 作用：菌体蛋白凝固；损伤细胞膜； ????? 灭活酶类 浓度：石炭酸为3%- 5%、来苏儿为2% 用途：地面、器具表面和皮肤的消毒 2 醇类 ： 作用机制：使菌体蛋白变性与凝固； 干扰细菌代谢 浓度：乙醇70%-75% 用途：用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡 3 重金属盐类： ?? 使细菌发生变性和沉淀；酶活性丧失 ?（1）2%红汞：皮肤、粘膜和小创伤??? ?（2）0.05-0.01%升汞：非金属器皿 4 氧化剂： ?? 氧化作用；使蛋白质变性 ? （1）0.1%高锰酸钾：皮肤、尿道、水果 ? （2）3%过氧化氢：创伤、皮肤粘膜 ? （3）2%-2.5%碘酒：皮肤消毒 ? （4）0.2ppm-0.5ppm氯：饮水