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《医学微生物学》实验三 1、固体培养基 平板 接种法 连续划线法 细菌在固体培养基中的生长现象 菌 落 ★ 菌落特征：大小、形状、颜色、气味、透明度、表面光滑或粗糙、湿润或干燥、边缘整齐与否、溶血性等。 ★ 菌落类型： S型、 R型、 M型菌落。 菌 苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。 注意事项 2、葡萄球菌培养（示教） 营养要求不高，普通培养基生长良好 3、链球菌培养（示教） 血平板上的菌落： 甲型溶血性链球菌形成草绿色溶血现象，乙型溶血性链球菌形成透明的完全溶血现象，丙型链球菌无溶血现象。 4、常见致病菌的形态与染色性 * 南华大学病原学实验中心 微生物学与免疫学教研室 1、细菌的人工培养（讲授） 2、细菌的培养方法： 固体培养基接种法（自做）； 半固体、液体培养基接种法（示教） 3、葡萄球菌、链球菌培养及生化（示教） 4、细菌的形态观察 自阅片：甲型链球菌、结核杆菌 示教片：淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌 实验内容 第四节 细菌的人工培养 p31 一、培养基（culture medium）： 是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖 使用的混合营养物制品。 常用培养基的种类 按营养组成和用途分 厌氧培养基 基础培养基 增菌培养基 选择培养基 鉴别培养基 二、细菌在培养基中的生长情况 据物理状态分 1、液体培养基： 均匀混浊、沉淀生长、表面生长（菌膜）； 多用于增菌 均匀混浊 对照 沉淀生长 2、固体培养基： 含1.5%琼脂 用于分离培养 菌落：单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见 的细菌集团。 纯培养：挑取一个菌落，移种到另一培养 基中，生长出来的细菌均为纯 种，称为纯培养。 菌落特征－大小、形状、颜色、气味、透明度、光滑或粗糙、湿润或干燥、隆起或扁平、边缘整齐与否、是否溶血等→有助于细菌鉴定 菌落（S型） 菌苔 菌落（R型） 光滑型 S型 粗造型 R型 粘液型 M型 3、半固体培养基：含0.3%~0.5%琼脂 鞭毛菌—混浊生长（沿穿刺线呈云雾状/羽毛状） 无鞭毛菌—沿穿刺线呈线状生长 用于检测细菌的动力和保存菌种 斜面划线示意图 4、斜面培养基接种法 应用：短期保存菌种 三、人工培养细菌的用途 在医学中的应用 1.感染性疾病的病原学诊断：明确病因，指导用药 2.细菌学的研究：细菌遗传、变异、耐药性 3.生物制品的制备：疫苗、类毒素、抗毒素 在工农业生产中的应用 （抗生素、维生素、酶制剂等） 在基因工程中的应用（ 基因工程菌→乙肝疫苗） 进入实验内容讲授 分区划线法 连续划线法 第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环 灭菌接种环，取菌准备 分区划线法 原划线 标本：混合菌液 分组：1人一个固体平板 菌落示意图 细菌在固体培养基中的生长现象 菌落（S型） 菌苔 菌落（R型） 光滑型 S型 粗造型 R型 粘液型 M型 1、无菌操作2、密而不重叠3、勿划破琼脂4、做好标记，第二天观察结果 菌 落： S型菌落，金黄色、表皮、腐生葡萄球菌各自形成金黄色、白色、柠檬色-脂溶性色素 血平板： 金黄色葡萄球菌形成的β-溶血环 金黄色色素 白色色素 甲链 α溶血 草绿色溶血 乙链 β溶血 丙链 不溶血 甲型溶血性链球菌 取材：纯培养物 染色法：革兰染色 放大倍数：10X100 自阅片之一 结核分枝杆菌 取材：痰涂片 染色法：抗酸染色 放大倍数：10X100 自阅片之二 菌体染成红色，细长略微弯曲杆菌，单个或分枝状排列； （非抗酸菌及细胞染成蓝色） 淋病奈瑟菌 示教片之一 取材：泌尿道脓性分泌物 染色法：革兰染色 放大倍数：10X100 淋病奈瑟菌 中性粒细胞分叶核 淋球菌染成红色/G-，肾形或豆形，成双排列 肉毒梭菌 示教片之二 取材：纯培养物 染色法：革兰染色 放大倍数：10X100 G+粗短杆菌，芽胞呈椭圆形，比菌体粗，次极端，细菌呈汤匙状或网球拍状 *