第1部分专题22土壤中分解尿素的细菌的分离与计数讲述.ppt

(2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌株数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)____________。 (3)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为___________________________________。 (4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？ [答案]　实验步骤：(2)稀释涂布平板 结果分析：(1)D　(2)1.17×108　(3)多　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落　(4)不能。因为不能排除杂菌来自培养基或培养过程。 本题出错原因是不理解菌落数目的统计规则。实验时，每一个浓度至少涂布三个平板，以增强实验的说服力和准确性。当样品的稀释倍数足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。计数时选择菌落数在30～300的平板计数，若某两个或多个稀释浓度下获得的菌落数符合条件时，再看两者菌落数的比值：若小于2，则取两者的平均值；若大于2，则取小者。 点击进入 * * * * * * * * * * * 返回 第 1 部分 专 题 2 课题 2 理解教材新知 把握热点考向 应用创新演练 知识点一 知识点二 考向一 考向二 1.测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平 板法和显微镜直接计数法。 2．稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目， 但统计结果往往比活菌数目低。 3．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作 唯一氮源的选择培养基分离该细菌。 4．鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基 中加入酚红指示剂，据是否变红进行判断。 [自读教材·夯基础] 1．筛选菌株的思路 (1)自然界中目的菌株的筛选： ①依据：根据它对 的要求，到相应的环境中去寻找。 ②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的 ，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。 生存环境 Taq DNA聚 合酶 (2)实验室中目的菌株的筛选： ①原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 其他微生物的生长。 ②方法：利用选择培养基分离。 a．选择培养基：允许 微生物生长，同时 其他种类微生物生长的培养基。 b．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以 作为唯一氮源，只有能合成 的微生物才能分解尿素。 目的菌株 抑制或阻止 特定 阻止 或抑制 尿素 脲酶 稀释涂布平板 稀释度 活菌 ②计数原则：一般选择菌落数在 的平板进行计数。 ③结果分析：统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是 。 (2)其他方法：利用 直接计数。 30～300 低 一个菌落 显微镜 圆褐固氮菌生活于土壤中，能以氮气作为氮源。请探讨、交流实验室分离圆褐固氮菌的方法。 提示：配制无氮培养基作为选择培养基。 [跟随名师·解疑难] 1．选择培养基的类型及作用 (1)在培养基中加入某种化学物质。如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入指的是在培养基的培养成分的基础上加入。 (2)改变培养基中的营养成分。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。 (3)改变微生物的培养条件。如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。 2．统计菌落数目 (1)稀释涂布平板法：