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目 录 摘要………………………………………………………………………1 关键词……………………………………………………………………1 Abstract………………………………………………………………1 Key words…………………………………………………………………1 引言…………………………………………………………………………1 1 材料与方法………………………………………………………………2 1.主要仪器和试剂…………………………………………………………2 1.1.1 主要仪器………………………………………………………2 1.1.2 主要试剂………………………………………………………2 1.1.3 主要试剂的配制………………………………………………3 1.2 实验方法…………………………………………………………3 1.2.1枯草芽孢杆菌的分离…………………………………………3 1.2.2染色体DNA的提取……………………………………………4 1.2.3分光光度计检测DNA纯度……………………………………4 1.2.4 DNA的琼脂糖凝胶电泳………………………………………5 2 结果与讨论……………………………………………………………………5 2.1菌株的鉴定结果……………………………………………………………5 2.2分光光度计法检测结果与分析……………………………………………5 2.3染色体DNA的琼脂糖凝胶电泳结果与分析……………………………5 2.4关于DNA提取过程的讨论……………………………………………6 参考文献………………………………………………………………………7 致谢 ……………………………………………………………………7  枯草芽孢杆菌染色体DNA的提取 生物科学专业学生 宋验红 指导教师 孙迅 摘要：从土壤中分离纯化并初步鉴定了一株枯草芽孢杆菌，用溶菌酶裂解该菌株，用蛋白酶K和RNase A分别水解去除蛋白质和RNA，用分光光度计检测DNA的纯度和浓度，做琼脂糖凝胶电泳，检测DNA样品的质量。结果显示，从50mL菌液中提取出10μg DNA,并获得了较完整的琼脂糖凝胶电泳DNA条带。 关键词：枯草芽孢杆菌, 染色体DNA, 提取, 琼脂糖凝胶电泳 The extraction of chromosomal DNA in Bacillus subtilis Student majoring in Biology Science SongYanhong Tutor Sun Xun Abstract：acillus subtilis was isolated from soil and identified preliminarily .The strain was catalytically dissolved by lysozyme ,and the protein and RNA in the cell were hydrolytically removed by proteinase K and RNase A, respectively. The results showed that 10μg of chromosomal DNA of bacillus subtilis was extracted out from 50mL of the strain culture by spectrometry , and the DNA sample was complete through agarose gel electrophoresis . Key words：bacillus subtilis，chromosomal DNA，extraction，agarose gel electrophoresis °C冰箱中保存。 1.1.3.2 1M Tris-HCl缓冲液(pH8.0) 在800mL水中溶解121.91g Tris碱（三羟甲基氨基甲烷，分子量121.14），加入浓盐酸，调pH至所需值，加水定容至1L，分装后高压灭菌。 1.1.3.3 0.5M EDTA(pH8.0) 在800mL水中加入186.1g乙二胺四乙酸二钠（分子量372.2）在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节pH值至8.0（约20g)，然后定容到1L,分装后高压灭菌。 1.1.3.4 GTE溶液 50mmol/L的葡萄糖、25mmol/L的Tris-HCl(pH8.0)、10mmol/L的EDTA(pH8.0)。 1.1.3.5 LB液体培养基 称取蛋白胨