分子生物总复习.doc

2011年《分子生物学基础》本科生答疑专用 一、PPT1 1、1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型 2、DNA双螺旋结构模型的意义： DNA复制的明显方式——半保留复制。Waston和Crick在1953年就指出：DNA可以按碱基互补配对原则进行半保留复制。而在此之前对复制方式人们一无所知。 基因和多肽成线性对应的一个可能的理由：DNA核苷酸顺序规定该基因编码蛋白质的氨基酸顺序；DNA中的遗传信息就是碱基序列；并存在某种遗传密码(genetic code)，将核苷酸序列译成蛋白质氨基酸顺序。 该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础。该模型的提出是本世纪生命科学的重大突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个生命科学飞速发展的基石。 二、PPT2 1、原核生物特点： DNA；,无细胞骨架；④以无丝分裂或出芽繁殖。 包括：支原体,细菌,兰藻,螺旋藻(人类未来的蛋白质食物新来源) 2、真核生物三大结构体系： 膜系统：质膜,内膜系统,细胞器； 细胞核系统：遗传信息表达系统；骨架系统：细胞质, 细胞核等的骨架系统 3、类核体：通常含有一个折叠成类核体附着在质膜上的环状染色体。 4、质粒：携有一定遗传信息的质粒，包括小分子的脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)、核糖体：合成蛋白质的场所 5、原核生物表面的纤毛作用：可使细胞能够附着在其他细胞的表面上；而鞭毛的作用是：旋转运动可使细胞游动。 6、溶酶体：是小的有膜包围的细膜器，从高尔基体出芽而成，并且含有各类能降解蛋白质、核酸、脂类和糖类的消化酶。溶酶体起着从细胞外带进大分子或来自损伤细胞器的大分子的回收中心的作用。 7、微体：乙醛酸循环体是特定的植物过氧化物酶体，进行乙醛酸循环。溶酶体、过氧化物酶体和乙醛酸循环体合称微体 8、大小和密度不同的细胞器，例如细胞核与线粒体、可以根据它们的沉降系数值不同由差速离心法互相分离并与其他细胞器分开。 9、通常在DNA样品的分析中，往往选用测量样品的吸光度来鉴定其浓度和存度，DNA的吸收峰在 260 nm，蛋白质的吸收峰在 280 nm。纯净的DNA A260/A280比值约为 1.8 ，纯净的RNA A260/A280比值约为 2.0 。 10、HGP是人类基因组计划（Human Genome Project）。 三、PPT3 1、大多数蛋白质都含有这些氨基酸残基，因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。2、生物体内的氨基酸类别：蛋白质氨基酸：蛋白质中常见的20种氨基酸 其中稀有的蛋白质氨基酸蛋白质组成中，除上述20种常见氨基酸外，从少数蛋白质中还分离出一些稀有氨基酸，它们都是相应常见氨基酸的衍生物。如4-羟脯氨酸、5-羟赖氨酸等。 非蛋白质氨基酸： 3、氨基酸的性质： （1 ）两性解离和等电点。（2 ）光学性质。（3 ）重要化学反应 a.与茚三酮反应：用于氨基酸定量定性测定。 b.与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应（sanger反应）：用于蛋白质N-端测定。 c. 与苯异硫氰酯（PITC）的反应（Edman反应），用于蛋白N-端测定，蛋白质顺序测定仪设计原理的依据。 sanger反应：氨基酸与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应 Edman反应：氨基酸与苯异硫氰酯（PITC）的反应蛋白质的一级结构：多肽链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置称为蛋白质的一级结构(primary structure)。这是蛋白质最基本的结构，它内寓着决定蛋白质高级结构和生物功能的信息。 蛋白质的二级结构（secondary structure）：指肽链主链不同区段通过自身的相互作用，形成氢键，沿某一主轴盘旋折叠而形成的局部空间结构，是蛋白质结构的构象单元．主要有以下类型：(１) α－螺旋 (２) β－折叠 (３) β－转角 (４) 无规则卷曲 蛋白质四级结构：是指由相同或不同的称作亚基（subunit）的亚单位按照一定排布方式聚合而成的蛋白质结构，维持四级结构稳定的作用力是疏水键、离子键、氢键、范得华力。亚基本身都具有球状三级结构，一般只包含一条多肽链，也有的由二条或二条以上由二硫键连接的肽链组成。 论述：蛋白质的主要功能是什么？ 催化功能；结构功能；调节功能；防御功能；运动功能；运输功能；信息功能；储藏功能…… 酶：除了少数有催化活性的RNA分子外，几乎所有的酶都是蛋白质。酶可以将生化反应速度提高几个数量级。 底物与特殊氨基酸侧链间的结合是通过各种非共价相互作用。这些相互作用包括范德华力、氢键、盐桥和疏水力。结合的特异性极高，像只与单一底物结合（例如葡萄糖氧化酶只与葡萄糖