医功院废气.doc

微生物是医院获得性感染的主要因素，医院环境的生物污染可以引起一系列传染病的爆发流行。近几年的研究表明，一些气载病原微生物能够通过空气传播造成传染病的流行。过去对医院环境微生物气溶胶的传播主要是通过培养皿的自然沉降法检测细菌浓度的变化以及细菌耐药性及某些致病菌含量等方面来确认的。然而，未能证明医院病房环境、门诊房间内外环境分离的微生物气溶胶的起源及其同源性，未能用国际上通用的ANDERSEN-6采样器等来测定气溶胶微生物的含量等。因此，本课题测量了ICU病房、门诊注射室空气环境(5个医院的ICU病房环境及楼道、门诊注射室3个房间及走廊和大厅)的气载需氧菌的含量，在此基础上，(1)统计ICU病房环境、门诊注射室环境气载大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的含量；(2)对从ICU病房环境分离的87株气载大肠杆菌的耐药性及其ESBLs耐药基因的进行了检测：(3)采用分子生物学方法(ERIC-PCR)对ICU病房和门诊注射室空气环境中不同地点分离到的共131株大肠杆菌(其中病房87株、门诊44株)的遗传相似性进行聚类图的比较；(4)采用血清学分型方法，进一步对从门诊注射室环境、ICU病房环境及周围空气环境中分离的131株大肠杆菌同时进行了4组致病性因子的鉴定；(5)结合RFLP、PFGE、流式细胞仪技术(flow cytometer，FCM)对大肠杆菌的耐药性、耐药异质性进行了检测。通过膜联蛋白V(Annexin V)和PI(propidium iodide)的双染色，做了细菌凋亡(apoptosis)的研究探讨。根据以上研究结果，评估了医院环境微生物气溶胶的危害性及其向环境中的传播。 1、ICU病房、门诊注射室环境气载需氧菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的含量 本试验采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在5个医院的ICU病房环境及距病房环境5m、10m的走廊和大厅，一个医院门诊注射室环境的3个房间及其公共走廊和大厅的不同距离收集气溶胶微生物，一方面，通过对医院环境中气载需氧菌含量、气载大肠杆菌含量、气载金黄色葡萄球菌含量的检测，以及它们在ANDERSEN六级采样器上的分布规律来推断其对病人及医务工作人员自身可能造成的危害，从而使人们对医院空气环境中产生的微生物气溶胶及其健康威胁的高度重视。研究结果表明，5个病房环境内总的需氧菌含量和可吸入的需氧菌含量平均分别为126.8和70.38 CFU/m3空气。可吸入的需氧菌与需氧菌总的含量之比在47.9～70.2％之间，并且在5个病房环境内所检测的结果并没有很大差异(p>0.05)。5个ICU病房环境内总的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌含量分别为63和96 CFU/m3空气；可吸入的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌含量分别为43和81 CFU/m3。而且，每一个ICU病房环境内气载大肠杆菌和气载金黄色葡萄球菌的含量差异极显著(p<0.01)。在5个病房环境内可吸入的金黄色葡萄球菌含量占总的金黄色葡萄球菌含量的比例在59.8～79.2％之间，而且它们之间并没有显著差异(p>0.05)。门诊注射室环境气载需氧菌和大肠杆菌在五个采样点(Room A、B、C、Comdor、Hill)的浓度分别是211和18 CFU/m3；206和18CFU/m3：304和13 CFU/m3；567和22 CFU/m3；651和18 CFU/m3。走廊和大厅中需氧菌和可吸入的需氧菌浓度明显高于房间内的(p<0.05)。气载需氧菌中主要以葡萄球菌属和埃希氏菌属为主，其中革兰氏阴性菌占需氧菌总数40.08％～46.98％。 2、ERIC-PCR对医院空气环境中气载大肠杆菌向室外环境传播的鉴定 本课题测定了5个ICU病房和1个注射室及其公共走廊和大厅不同距离的空气环境中大肠杆菌含量，在细菌学鉴定的基础上，采用ERIC-PCR方法对不同地点分离到的大肠杆菌鉴定其同源性，获得大肠杆菌ERIC片段指纹图谱，通过该片段在细菌基因组内的数量和分布之间的关系，比较其遗传相似性，确定医院环境内微生物气溶胶向环境中的传播。ERIC-PCR结果表明，从ICU病房环境中分离到的大肠杆菌与距病房环境不同距离楼道内(5m和10m)分离到的40株大肠杆菌相似性可达100％，22株大肠杆菌的相似性在90％以上；从注射室环境三个房间、公共走廊和大厅内分离到的大肠杆菌10株相似性可达100％，18株大肠杆菌相似性在90％以上。由此，可得出结论，ICU病房环境内和楼道内的分离到的大肠杆菌极有可能来源于病房环境内的同一菌株，注射室环境内，公共走廊和大厅内分离到的大肠杆菌也可能来源于同株大肠杆菌。说明源于医院环境内微生物气溶胶能够通过气体交换和人员的流动向周围环境传播，通过气象条件和人员流动传播到不同的距离，造成周围环境的空气污染，引起医院环境的获得性交叉感染