分子生物学第四章1改概念.ppt

4.3.1 核糖体的结构 核糖体是一个致密的核糖核蛋白颗粒，可以解离为大小两个亚基，大亚基约为小亚基相对分子质量的二倍。每个亚基都含有一个分子质量较大的rRNA和许多蛋白质分子。这些大分子rRNA能在特定位点与蛋白质结合，从而完成核糖体不同亚基的组装。 沉降系数（sedimentation coefficient，s）根据1924年Svedberg对沉降系数下的定义：颗粒在单位离心力场中粒子移动的速度。 来源 核糖体 大亚基 小亚基 脊椎动物 80S 沉降系数 rRNA 沉降系数 rRNA 60S 20～29S 40S 18S 5S 5.8S 无脊椎动物、植物 80S 60S 25S 40S 16～18S 5S 5.8S 细菌 70S 50S 23S 30S 16S 5S 表4－11 几种不同生物核糖体及rRNA的组成 大肠杆菌核糖体小亚基由21种蛋白质组成；大亚基由36种蛋白质组成。真核细胞核糖体大亚基含有49种蛋白质；小亚基有33种蛋白质。 核糖体蛋白质的空间结构。 在高倍电镜下得到的原核生物70S核糖体大、小亚基相结合的模型，核糖体分子可容纳两个tRNA和约40bp长的mRNA。 mRNA tRNA 大亚基 小亚基 4.3.2 核糖体的功能 核糖体存在于每个细胞中进行蛋白质的合成。尽管在不同生物体内其大小有别，但组织结构基本相同，而且执行的功能完全相同。 在单个核糖体上，可化分多个功能活性中心，在蛋白质合成过程中各有专一的识别作用和功能。 ●mRNA结合部位——小亚基 ●结合或接受AA-tRNA部位（A位）——大亚基 ●结合或接受肽基tRNA的部位——大亚基 ●肽基转移部位（P位）——大亚基 ●形成肽键的部位（转肽酶中心）——大亚基 * * Fig 14-14 Overview of the events of translation/ribosome cycle * * Polysome/polyribosome: an mRNA bearing multiple ribosomes Each mRNA can be translated simultaneously by multiple ribosomes Fig 14-15 A polyribosome * * 由若干核蛋白体结合在一条mRNA上同时进行多肽链的翻译所形成的念球状结构称为多聚核糖体(polysome)。 一条mRNA链上同时具有许多个核糖体 （每隔80核苷酸有一个核糖体） 一条mRNA可同时合成多条多肽链 小结 1、核糖体的结构 2、核糖体的功能 习题 1．名词解释：翻译 ；密码子 ；密码的简并性 ；同义密码子 ；移码突变；开放阅读框架;多聚核糖体 2．遗传密码是如何破译的? 3．遗传密码有什么特点? 4、tRNA分为那几类?简述tRNA的结构和功能。 AUGC 噢利亚 * 外显子6a?及其邻近相关酶裂解位点序列虽然长达27aa，但是当它连到GFP C端时，活性并未受到明显影响，日光下仍然为绿色，在荧光条件下发出绿色荧光，并且赋予了GFP新的功能；如结合细胞外基质，同时也可以和琼脂糖肝素柱结合，也有利于连有该片段的融合蛋白的纯化。 GFP6a等电点8.44,GFP等电点5.86 * 错义抑制tRNA 要和正常的tRNA去竞争，因此成功率50％ 无义抑制－－－－也会造成对正常终止密码子的通读，产生比野生型长的蛋白质 ● 遗传密码——三联子 ● tRNA的结构、功能与种类 ● 核糖体的结构与功能 ● 蛋白质合成的过程 ● 蛋白质的运转机制 Contents 4.2 tRNA tRNA在蛋白质合成中为每个三联密码子翻译成氨基酸提供了接合体，为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供了运送载体，它又被称为第二遗传密码。 受体臂：链两端碱基序列互补形成的杆状结构；3′端有未配对的3～4个碱基；3′端的CCA，最后一个碱基2′或3′烃基(-OH)可被氨酰化。此臂负责携带特异的氨基酸。 TψC臂：其中ψ表示拟尿嘧啶，是tRNA分子所拥有的不常见核苷酸。此臂负责和核糖体上的rRNA 识别结合。 4.2.1 tRNA的结构 二级结构：三叶草形 反密码子臂：位于套索中央有三联反密码子。它负责对密码子的识别与配对。 D臂：含有二氢尿嘧啶（Dihydrouracil），负责和氨基酰tRNA聚合酶结合。 额外环：(extra arm)可变性大，从4 Nt到21 Nt不等，其功能是在tRNA的L型三维结构中，负责连接两个区域（D环－反密码子环和TψC-受体臂）。 三级结构: L形 tRNA的三级结构，都呈L形折叠式，而这种结构是靠二级结构中未配对碱基间所形成的氢键来维持的。tRNA的三级结构与氨酰-tRNA合成酶对tRNA的