梅毒血清学实验和临床相关问题.doc

梅毒的血清学试验和临床相关问题（1）梅毒是由梅毒螺旋体（Treponema pallidum，TP）引起的一种慢性传染病。对梅毒的诊断除了通过临床症状外，主要是通过实验室血清学试验进行诊断。以下对于梅毒的相关试验进行概述。 ??????? 梅毒螺旋体的抗原结构十堰市人民医院皮肤科彭才智 1. 外膜脂蛋白抗原：具有强免疫原性，是梅毒螺旋体的主要免疫优势抗原。 2. 轴丝抗原：是梅毒螺旋体的运动器官，其免疫原性很强，可以刺激机体产生细胞和体液免疫应答。3. 4D抗原：为螺旋体特异性表面抗原 ????????机体对梅毒螺旋体感染的免疫应答包括： 1. 非特异性类脂质反应素抗体：即抗心磷脂（cardiolipin）抗体，又称为反应素。是梅毒螺旋体在破坏机体组织的过程中，体内释放一种心磷脂抗原，这种抗原可刺激机体产生相应的抗体。反应素多为IgA和IgM混合型抗体，此类类脂质抗体在体外可增强巨噬细胞对梅毒螺旋体的吞噬作用。未经治疗的梅毒患者血清中反应素可长期存在，经适当治疗后可逐渐减少，直至消失。 2. 抗密螺旋体的特异性抗体：早期患者以产生针对梅毒螺旋体轴丝中37KDa鞘亚单位成分的IgM抗体为主；另外还有针对梅毒螺旋体多肽（分子量分别为45、42、33、30、16.5、15.5KDa）的抗体。二期梅毒时，血循环中可出现抗全部梅毒螺旋体抗原的IgM和IgG抗体，对多肽的抗体除了以上六种外，又增加了另外16种多肽抗体。如经治疗，IgM抗体浓度降低，血清中只能检出IgG抗体。当疾病进入晚期时，则血循环中的某些抗梅毒螺旋体抗原多肽的抗体会逐步消失。 ??????? 梅毒血清学检查 1．经典的梅毒血清学试验 补体结合试验：1906年由Wasserman建立，是最早使用的梅毒螺旋体感染诊断的血清学试验。 ?? 絮状沉淀试验：1920年由Kahn建立.( 2．使用类脂质抗原的血清学试验 性病研究实验室试验（ Venereal diseaseresearch laboratory test,( VDRL） ?不加热血清反应素试验(Unheated serumreagin test, USR)( ?快速血浆反应素环状卡片试验(Rapid plasmareagin circle card test， RPR)( ?甲苯胺红不加热血清试验（ Toluidine redunheated serum test ， TRUST）( 使用类脂质抗原的血清学试验：优缺点---测定操作简便快速，对一期梅毒的阳性反应出现较早，对二期梅毒也有诊断价值。但该试验特异性较差，生物学假阳性可见于多种疾病，如麻风、结核、红斑狼疮、类风湿性关节炎、猩红热、慢性肝病、HIV感染等。由于感染梅毒螺旋体后，机体血循环中心磷脂抗体的出现要晚于特异性的抗梅毒螺旋体抗体，并且晚期梅毒这类抗体还有可能转阴，因此，上述过筛试验不适于一期梅毒早期和三期梅毒的临床诊断。 3．使用密螺旋体抗原的血清学试验 ?荧光密螺旋体抗体吸收试验（Fluoresenttreponemal antibody-absorption test,FTA-ABS） ?梅毒螺旋体血球凝集试验（Treponema pallidumhemagglutination assay, TPHA） ?梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（Treponemapallidum particle agglutination assay, TPPA） ?酶联免疫吸附试验（ELISA）( ?蛋白印迹技术（Western blotting, WB）( 荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 本试验是将梅毒螺旋体Nichols株抗原直接涂在载玻片上，然后将密螺旋体无毒株（Reiter株）制成吸收剂加至待测血清标本中反应30分钟，以去除同属抗原的交叉反应。再将吸收后的血清加到玻片的抗原膜上，37温育30分钟，用PBS缓冲液冲洗晾干，再加荧光素标记的抗人IgG， 37温育后冲洗，晾干，最后在荧光显微镜下观察结果。本试验由于吸收试剂的使用， 提高了测定的特异性，可达92%。由于使用的是梅毒螺旋体Nichols株抗原，密螺旋体各种抗原分子均存在，提高了试验的敏感性。对一期梅毒的敏感性为80%，，二期为99~100%， 三期为95~100%。测定假阳性可见于高丙种球蛋白血症、全身免疫性疾病和生殖器疱疹等。FTA-ABS是公认的“经典”密螺旋体抗原的血清学试验。 梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 本试验是以梅毒螺旋体作为抗原的间接血凝试验，操作简便， 通常作为梅毒螺旋体感染的特异性验证试验。所用抗原为将梅毒螺旋体Nichols株经超声破碎后得到的可溶性抗原成分，用其致敏红细胞。同时，同样用Reiter株制成吸收剂稀释血清，可将血清中的非特异性抗体吸收掉， 以加强测定