山风组培苗生产技术规程征求意见稿.doc

ICS65.020.20 B 38 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T XXXXX—2017 山风组培苗生产技术规程 The somaclone production technology procedures of Blumea aromatica 2017 - XX - XX发布 2017 - XX - XX实施 广西壮族自治区质量技术监督局发布 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区卫生和计划生育委员会提出。 本标准由广西卫生标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：广西壮族自治区药用植物园。 本标准主要起草人： 山风组培苗生产技术规程 范围 本标准规定了山风（Blumea aromatica DC.）组培苗生产的术语与定义、组培苗生产技术、营养袋（杯）苗生产技术、包装与运输和生产档案。 本标准适用于广西壮族自治区境内中药材山风组培苗的生产。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 3095 环境空气质量标准 GB 4285 农药安全使用标准 GB 5084 农田灌溉水质标准 国家药品监督管理局第32 号令（2002 年） 中药材生产质量管理规范（试行） 下列术语定义适用于本。 将诱导产生的芽、苗、愈伤组织等培养物重新分割接种到新鲜培养基上进一步扩大培养 营养袋（杯）苗 将组培苗经炼苗后移栽于营养袋（杯）中，经过一段时间的生长而生成具有完整根茎叶结构的幼苗。 组培苗生产技术 外植体来源 选择物种鉴定准确、来源清楚、健壮、无病虫危害、性状稳定的山风植株。 外植体采集 时间 连续晴天2 d以上，上午9时～11时。 部位 带顶芽或腋芽的嫩茎，长 cm～ cm。 A。 外植体保存 通常即采即用。保存时间超过1 h，用干净湿润的纸或纱布包裹保湿或置于冰壶保存。 外植体灭菌 预处理 将外植体剪成2 cm～3 cm带腋芽或顶芽的茎段，置于烧杯中，用0.05％洗洁精溶液浸泡10 min，期间用毛笔轻轻刷洗，流水冲洗15 min后即可进行灭菌。 灭菌 在超净工作台上，用75％酒精浸泡外植体5 s～10 s后，用无菌水清洗1次，再用0.1％氯化汞浸泡，搅拌8 min，然后用无菌水清洗3次～4次，用无菌滤纸吸干表面水分后，将材料切成带顶芽或一个腋芽的茎段(约长0.5 cm)，注意切去接触过氯化汞溶液的带伤口茎段。 外植体接种 在超净工作台上，将已灭菌的带顶芽或一个腋芽的茎段斜插入诱导培养基中，见附录C的C.1。 组培苗培养 培养条件 初代和继代增殖培养的基本培养基为MS，生根培养的基本培养基为1/2 MS，培养基均附加3.0％蔗糖和0.5％琼脂，pH 6.0，配制分装后，于121 ℃灭菌20 min。培养条件为26 ℃、光照强度2 000 lx、光照时间10 h/d。 初代诱导培养 在超净工作台上，将已灭菌的外植体接种到诱导培养基中，见附录C的C.1。每瓶接种3个外植体。培养7 d～pH 4.5～pH 6.5的泥炭土-细河沙（3:1）为基质。移栽前24 h～48 h用0.5％高锰酸钾溶液进行消毒。 容器规格 营养袋（杯），规格为7 cm×10 cm或8 cm×12 cm。 移栽前炼苗 将组培瓶苗移至大棚或温室内炼苗3 d～5 d后，打开瓶盖继续炼苗2 d～3 d，打开瓶盖后注意早晚喷雾以防止组培苗萎蔫。 组培苗移栽 移栽时间 春季、初夏或秋季。 洗苗 用自来水漂洗干净组培瓶苗根部残留的培养基。 移栽 将组培苗栽入营养袋（杯）基质中间，轻压根部，淋透定根水，应确保根不外露，根土密接，植株固定不倒。 日常管护 温湿度条件 温度20 ℃～28 ℃。移栽后30 d内，空气相对湿度保持在85％～90％，以后保持在65％～70％，晴天需用遮光度50％的遮阳网遮荫。 施肥 组培苗长出新叶起，每隔7 d～10 d喷施0.1％～0.5％的含氮叶面肥1次。遵循先稀后浓，勤施薄施的原则。 主要病虫害防治 按GB 4285的规定执行，移栽初期每隔20 d～30 d喷施百菌清或多菌灵等杀菌剂1次，并根据病虫害状况针对性防治。 出圃苗规格 当幼苗长出5片以上新叶，且生长健壮、无检疫对象范围内病虫为害即符合出圃要求。 包装与运输 组培瓶苗 将经过开盖炼苗的组培瓶苗清洗干净根部培养基后，整齐装入保鲜盒或塑料泡沫箱内，并加胶带密封。长途运输应有保湿、降温、防风、防晒、防雨措施。运输环境温度15 ℃～30 ℃，避免阳光直射和剧烈颠簸，装运时间不超过48 h。 营养袋（杯）苗 将营养袋（杯）苗装入竹筐或塑料筐内，装运时应有序叠放。长途运输应