实验六细菌的革兰氏染色法.ppt

本次实验的内容 实验五 细菌的简单染色法 实验六 细菌的革兰氏染色法 实验七 细菌的芽胞染色法 实验八 细菌的荚膜染色法 微生物染色的基本知识 一 微生物染色的意义 1 进行微生物研究的基本技术; 2 微生物形态特征观察的基本方法; 3 不同形态微生物鉴别的基本技能。 二 微生物染色的染料 细菌染色的方法 * ① 碱性染料（basic dye）—电离后为带正电荷的阳离子，可与细胞中带负电的组分结合。如Crystal violet, Safranin, Methylene blue，malachite green等。 ② 酸性染料（Acid dye）—电离后为带负电荷的阴离子，可与细胞中带正电的组分结合。如Eosin, Congo red , Acid fuchsin 等。 ③ 脂溶性染料—如Sudan black。 实验五 细菌的简单染色法 一 目的与要求 1 掌握细菌的简单染色法 2 初步认识细菌的形态 3 巩固油镜的使用方法 二 基本原理 碱性染料电离后带正电能与带负电荷的细菌结合合,使其着色。 三 主要器材 1 枯草芽胞杆菌( 12~18h培养物) 2 吕氏碱性美兰染色液 3 仪器与用具(略) 染色方法 见下图 涂片 干燥 固定 染色2min 水洗、吸干 镜检 实验五 细菌简单染色的操作步骤 沾取菌样 五 染色结果 六 注意事项 1 菌龄合适。 2 注意涂片均匀，不宜过厚。 枯草芽胞杆菌示意图 实验六 细菌的革兰氏染色法 一 目的与要求 1 掌握细菌的革兰氏染色法 2 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性 二 基本原理 革兰氏染色法基本步骤：涂片固定 结晶紫初染色 碘液媒染 乙醇脱色 番红复染 革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性(G-)表现出不同染色反应的根本原因在于它们的细胞壁结构存在差异。 革兰氏阳性菌：紫色 革兰氏阴性菌：红色 Structure of a Gram-Positive Cell Wall Structure of a Gram-Negative Cell Wall 革兰氏阳性、阴性菌细胞壁结构的差异 实验六 细菌的革兰氏染色法 三 主要器材 1 金黄色葡萄球、大肠杆菌(约24培养物) 2 结晶紫、番红染色液 染色方法 结晶紫初染2min 碘液媒染1min 乙醇脱色30sec 番红复染2min 涂片固定 涂片制作 水洗 水洗 水洗 五 染色结果 革兰氏阳性菌——紫色 革兰氏阴性菌——红色 六 注意事项 1 菌龄合适。 2 注意涂片均匀，不宜过厚。 3 注意控制好脱色程度。 * * *