组织中脂质分析的高通量、高分辨的反相液相色谱线性离子阱傅立叶转换离子共振质谱联用方法的研究.pdf

第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 o．Zll 组织中脂质分析的高通量、高分辨的反相液相色谱一线性离子阱一 傅立叶转换离子共振质谱联用方法的研究· vo_rlder JanVander 胡春秀u，Rob Heijden2，GerwinSpijksma2，王梅3 Greef2，一，Thomas Hankemeier2，许国旺I” (1中科院大连化物所中科院分离分析化学重点实验室，大连610023；2DivisionofAnalytical CC Netherlands；3SUBioMedicineandTNO of Biosciences，LeidenUniversity，2333Leiden，The Quality AJ Life，3700Zeist，The Netherlands) 摘要：本研究运用高效反相液相色谱．线性离子阱．傅立叶离子共振质谱联用技术，在血浆样品脂质组 学分析平台基础上I，建立了一种高通量、高分辨的组织类样品脂质代谢物的分析方法。较其他脂质 分析方法，本方法由于采用了高分辨并能提供精确质量数的傅立叶转换离子共振质谱技术，因此在 对关键脂代谢标记物的鉴定方面更为准确、可靠。本方法单针进样能准确鉴定包括溶血磷脂酰胆碱 脂(PG)、胆固醇酯(ChoE)及甘油三酯(TG)等8种不同脂类化合物在内的近200种脂质代谢物。 关键词：高通量，高分辨，反相液相色谱．线性离子阱．傅立叶转换离子共振质谱，脂质 l 前言 脂质是细胞膜的重要组成部分，脂质分子在生命活动过程中发挥着重要作用二3，如细胞信号传 导、细胞膜固定、细胞代谢、能量储层以及产生生物活性分子等。从系统生物学角度研究生物体在 不同的生理状态、生物体受到外界刺激和疾病干扰后脂类代谢物及其与其他生物分子相互作用的变 化，来识别代谢调控中关键的脂生物标记物，进而揭示脂质在活性生物系统中的生物作用机制，已 成为当前脂质研究的热点。 2实验部分 2．1仪器与试剂 Fisher，SanJose，CA，USA)；自动进样器 线性离子阱．傅立叶转换离子共振质谱仪(Thermo (Survoyer,Thermo Netherlands)。 仪(RSoNS，The with 乙腈、异丙醇、甲醇(ULC-MSgrade)，高纯水(MSgrade)，二氯甲烷(HPLCgrade—Stabilized LPC、15：0PE、19：0PC、14：0PG、15：0 Ethan01)，甲酸氨(99．995％；Sigma)。内标物：19：0 TG(I内标 LPC、17：0PE、17：0 PG、17：0 物组1)；17：0 PC、17：0 TG(I勾标物组2)。 2．2分析条件 50 2．1×1 Ascentis@Express柱：2．7“mC8 mm(Sigma-AldrichCo．)；流动相，A：40％水一60％乙 ml／min；柱温55。C． 腈(10mM甲酸氨)；B：10％乙腈．90％异丙醇(10mM甲酸氨)。柱流速0．26 oC。 MS：ESI离子源；离子源电压为3．8kV,毛细管电压为28．8kV,毛细管温度为300 2．3样品处理