黄色须腹菌发酵动力学总汇.doc

黄色须腹菌发酵动力学研究 马仕波，叶建仁( (南京林业大学森林资源与环境学院，江苏 南京 210037) 摘要：本文对黄色须腹菌发酵罐发酵动力学进行了研究。通过分批发酵的方式，明确了发酵罐发酵过程中菌丝体比生长速率为0.158h-1，碳源用于产物积累的得率常数为-0.00035h-1，以及菌丝体生长动力学模型和基质消耗动力学模型。同时对实验数据与模型进行了验证比较，模型计算与实验结果拟合良好，模型能很好地反应黄色须腹菌菌丝体生长及基质消耗过程。 关键词：黄色须腹菌，分批发酵，动力学 中图分类号：TQ920.1 文献标识码：A Fermentation kinetics of Rhizopogon luteous MA Shi-bo, YE Jian-ren* (College of Forest Resources and Environment Nanjing Forestry University, Nanjing 210037) Abstract：It studied the?fermentation?kinetics of Rhizopogen luteous. The study suggested that the mycelium specific rate was 0.158h-1 , carbon source for the product accumulation rate constant was -0.00035h-1, and mycelium growth model and substrate consumption dynamics model was obtained in batches. Also we validated with the experimental data. The results showed that the model and experimental data fit well and the two models could reflect the mycelium growth process and the process of dynamic substrate consumption well. Key words：Rhizopogon luteous；Batch fermentation；Dynamics 黄色须腹菌是一株优良的侵染松科树种的外生菌根真菌[]，采用生物技术方法利用液体发酵培养菌丝体，并利用发酵液方法。]。在]。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1实验菌株 黄色须腹菌(Rhizopogen luteous)，由南京林业大学森林病理实验室提供。 1.1.2试剂 葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、维生素B1、氢氧化钠、盐酸、3，5-二硝基水杨酸，180r/min)培养144h，把长势旺盛的菌丝体用灭菌的匀浆机打成匀浆，制得种子液。 1.2.2发酵罐培养 发酵温度设定为28℃，罐压0.05MPa，装料系数0.5，消泡剂0.05%，接种量%，初始溶氧量100%，通气流量5L/M，初始转速0rpm，初始pH值每h取样一次，每次取200mL发酵液离心(5000×g，20min)，倒出上清液，测定上清液总糖浓度，滤得菌丝体，℃烘干至恒重，称量。溶解氧、pH值、温度、转速、通气量等参数由发酵之星自动在线监测并记录数据。葡萄糖标准溶液1g/L)：准确称取 1.00 g 分析纯的无水葡萄糖(100 下烘干至恒重)，溶解于 1000 mL 蒸馏水中。 35-二硝基水杨酸DNS)溶液：称取 6.5 g 3，5-二硝基水杨酸溶于少量蒸馏水中，溶解后移入 1000 mL 容量瓶中，加入 2 mol/L NaOH 溶液 325 mL，再加入丙三醇 45g丙三醇，摇匀，冷却后定容至 1000 mL，然后盛于棕色瓶中，放置。总糖的测定DNS法分别吸取葡萄糖标准液1mg/mL) ，0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2与10 mL的具塞试管中，准确加入DNS试剂1.5mL，再用蒸馏水补至3.5mL沸水浴中加热5min流水冷却，后定溶。在530nm 处测定吸光度，并绘制葡萄糖标准曲线、]。取5 mL发酵液5000×g离心20 min，取1 mL上清液于25 mL具塞试管，加入5 mL 的6 mol/L的盐酸，并在沸水浴中加热15～30 min，以碘-碘化钾溶液检查其水解是否完全，不呈现蓝色说明水解完全。冷却后转移至三角烧瓶，加入一滴酚酞试剂，以10% NaOH溶液中和至溶液呈微红色，过滤并定容至25 mL。吸取2mL待测液与10 mL的具塞试管中，准确加入DNS试剂1.5 mL，再用蒸馏水补至3.5 mL，沸水浴中加热5 min，流水冷却，后定溶。