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［应用纪要］ ［应用纪要］ 基于沃特世ACQUITY UPLC 系统的多糖数据库 1 1 1 1 2 1 Mark Hilliard 、 Weston Struwe 、 Barbara Adamczyk 、 Radka Saldova 、 Ying Qing Yu 、 John O'Rourke 、 Giorgio 1 1 Carta 、和Pauline Rudd 1 爱尔兰都柏林国家生物工艺研究和培训学院 （ ） NIBRT 2 沃特世公司，美国马萨诸塞州米尔福德 方案优势 引言 由 软件控制的 荧光 糖基化是最复杂的蛋白质翻译后修饰类型，有一半以上的蛋白质为糖 Empower ACQUITY UPLC/ FLR 检测系统是一个功能强大的一体化分析平 蛋白，确定通过共价键与蛋白质表面相连的寡糖结构对于阐述糖蛋白 台，适用于分析糖蛋白上相连的寡糖。 的功能也非常重要。糖蛋白类的生产也是非常具有挑战性的，有许多 因素能够影响蛋白质的糖基化，包括蛋白表达系统和细胞类型、培养 基成分以及发酵过程的工艺参数 （例如溶氧、 值、碳源和温度）。 pH 生物药物的糖基化通常是影响药物有 效性和安全性的关键因素。生产工艺 的波动可能会对产品质量造成影响， 因此，在整个工艺过程中都需要准确 地监控糖基化的情况。 www.nibrt.ie 沃特世与爱尔兰国家生物工艺研究培训所 （ ）已经联合开发出了 NIBRT 多糖数据库，此数据库是基于UPLC BEH Glycan分析方案。 图 列出了 使用的分析平台。 联寡糖通过糖苷酶 （ ）对蛋 1 NIBRT N- P NGase F 沃特世解决方案 白质进行酶切处理得到，然后用 氨基苯甲酰胺对其进行荧光标记， 2- ® 再使用亲水相互作用色谱 （ ）对标记后的寡糖混合物进行分离。 ACQUITY UPLC 系统 HILIC ACQUITY UPLC FLR荧光检测器 采用沃特世ACQUIT Y UP LC® 超高效液相色谱系统和