假单胞菌M18转录调节因子σS基因与无启动子lacZ 基因融合突变株的构建和鉴定.pdf

卷 期 !" # 微 生 物 学 报 !"（）： # ’%( ) ’&* 年 月 日 $%%" &% ! !"#$ %&"’()&(*(+&"$ ,&-&"$ ! +,-./01 $%%" !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! $ 假单胞菌!"# 转录调节因子 基因与无启动子 ! *$". 基因融合突变株的构建和鉴定 ， & $ & " 葛宜和 ，许煜泉 & （上海交通大学生命科学技术学院 上海 $%%$!% ） $ （鲁东大学生命科学学院 烟台 $"!%$# ） 摘 要：通过菌落原位杂交和K.>-I01F 杂交，从假单胞菌L&4 基因组文库中克隆了!"#$ 基因及相邻序列。为了深 入研究影响 基因表达的调控因素，运用同源重组技术，将无启动子 半乳糖苷酶基因（ ）插入并融合于 !"#$ 5 5 M%&’( ! 基因中，构建了假单胞菌 基因突变株 。 法测定显示，突变株 的 半乳糖苷酶可高 !"#$ L&4 !"#$ L&4KN L=7701 L&4KN 5 ! 达 ，而野生株检测不到 半乳糖苷酶活性。表明，突变株中的 基因与无启动子 半乳糖苷酶基因已融合 !4%O 5 !"#$ 5 ! ! 并且表达。在 培养基中生长量测定（ ）的结果表明，突变株与野生株生长存在显著差异。 PL2 )*"%% 关键词：假单胞菌 ； ； ；插入突变；融合；鉴定 L&4 !"#$ %&’( 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Q’4 3 %%%&5"$%( $%%" %#5%’%(5%# 原核生物在不同生长时期和不同的环境胁迫因