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一、摘要……………………………………………………………………1
(一)中文摘要…………………………………………………………1
(二)英文摘要…………………………………………………………3
二、正文……………………………………………………………………5
(一)前言………………………………………………………………5
(一)丹!J舌……“”…”“…”…”………………………一………””…’
(二)第一部分乳腺癌细胞中Sm.1基因的甲基化状态
材料和方法……………………………………………………7
结果………………………………………………………···1l
讨论…………………………………………………………12
(三)第二部分:5.氮杂胞苷对S唧一1基因去甲基化作用的研究
材料和方法…………………………………………………13
结果…………………………………·……………………一16
讨{仑·…………·…·……·…··………··……………··……··20
(四)结论……………………………………………………………22
(五)参考文献………………………………………………………23
OOO………………小……………………………26
三、综述……………OOO
(一)综述…………………………………………………………26
(二)参考文献………………………………………………………32
五、致谢…………………………………………………………………37
乳腺癌SHP-1基因甲基化状态及其对细胞增殖
与凋亡的影响
硕士生姓名:王琨
指导教师:赵作伟教授
专业名称:外科学
摘要
目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率在全球范围
内呈逐年上升的趋势。尽管在乳腺癌的早期诊断和治疗等方面我们取得了一定的
进展,但全球每年仍有约50万的女性死于乳腺癌,目前乳腺癌发病率已位居女性恶
性肿瘤首位。近年来随着环境、生活方式的变化、生活水平的提高以及饮食结构
改变等原因,我国乳腺癌的发病率也呈逐年上升趋势,严重危害着广大女性的心
身健康和生活质量。
肿瘤的发生、发展是不同致癌因素通过不同的途径激活原癌基因和(或)使
抑癌基因失活导致细胞增殖和凋亡失调所致。目前对表观遗传学的重要研究内容
为DNA甲基化,认为人类的发育和肿瘤疾病的发生与DNA甲基化有着密切关系,
特别是CpG岛甲基化异常状态所致的抑癌基因失活及癌基因激活问题。最近研究
证明,乳腺癌中基因表型的改变,在肿瘤的发生与发展过程中起到重要作用,特别
是抑癌基因DNA的甲基化表达异常,被称为是重中之重。SHP一1基因是近年来发现
的抑癌基因,是众多蛋白酪氨酸激酶之一,主要表达在造血细胞中被称为造血细胞
cell
磷酸酶(hematopietic
可以调节细胞内信号蛋白分子酪氨酸的磷酸化水平,抑制细胞的增殖、分化和活
性。
虽然SHP一1基因对肿瘤的抑制功能已经被证实,但其在乳腺癌细胞中作用机
制是怎样产生作用的仍不十分清楚,其表达的调控机制等也尚未完全明确。本研
究以乳腺癌MCF一7细胞系为研究对象,检测乳腺癌中SHP-1基因的甲基化状态,并
和凋亡的影响,探讨SHP一1基因甲基化在乳腺癌发生发展中的作用,为乳腺癌的诊
断和治疗提供新的依据和方向。
方法:④用甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MSP)和非甲基化
特异性PCR(unmethylation—specific
甲基化状态,MSP、U13一MSP方法分别检测接受和未接受去甲基化处理的乳腺癌MCF-7
n2
andthe
BreastcancerSHP·-1 condition
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