草鱼活性肽的降血压功效及吸收评价.pdf

摘 要 文利用DA201-C 大孔吸树脂对草鱼活性进行处理比较处理前 灰分含分子酸组对血管紧素转化angiotensin I-converting enzyme , ACE) 的抑活性化性的化对草鱼活性 进行体外血管紧素转化抑活性的检测体内降血压效果的评利用人 肠类腺癌胞(the human colon carcinoma cell line, Caco-2)单层模型对从草鱼 中纯化的Val-Ala-Pro (VAP) 的合体进行模拟小肠皮组的吸收 利用 DA201-C 大孔吸树脂对草鱼进行室温以 10mg/mL 的浓 度样吸过洗浓缩燥灰分少 3.89% 率82.02% 含 62.07%增大 89.35% 草鱼得到浓缩分子集中在400-900Da 疏水酸得到效富集 272.6mg/g 增大到 338.2mg/g 总酸的 44.15% 处理ACE 抑活性显著提高半抑浓度IC50 0.34 0.26mg/mL 对DPPH 自的清除率增强IC50 5.89 4.50mg/mL 总化能力增大总化Ferric reducing antioxidant potential Assay, FRAP 值 1.018 增大到 1.261 高效液相谱法(high performance liquid chromatography, HPLC) 检测草鱼 活性体外 ACE 抑活性马酸(hippurie acid, HA)和马酞组酞酸 (Hippuryl-His-Leu, HHL) 的保留时间分别9.899min 和 10.522min分离良好 检测线3.125µg/mL 精密度RS 1.71%样回收率99.5% 方法行 靠体外草鱼对ACE 抑活性的IC50 0.26mg/mL 以原发性高血压大鼠Spontaneously Hypertensive Rats, SHR 和常血 压都大鼠Wistar Kyoto Rats, WKY 模型对草鱼活性进行体内降压效 果的评次灌胃验中给药 6-9h SHR 各组血压达最值中最 高剂组GCP 100mg/kg最大降幅30mmHg 性对照托利无显著 性差p0.05 长期验中以高中剂GCP 托利灌胃大鼠 周SHR 各组血压明显降且呈剂和时间依赖系4w GCP II 高剂组100mg/kg中剂组50mg/kg 剂组20mg/kg 血压降幅 分别20.7 14.0 和7.2mmHg 托利能显著降WKY 大鼠血压而GCP 最高剂对血压没影响6w SHR 血浆中ACE 活性血管紧素 Angiotensin , Ang 浓度随着给药剂的增大而渐降素renin, RA 和化(nitric oxide,NO) 的浓度给药剂呈负相势中高剂 组的RA 和NO 水性对照显著性差(p0.05) 果表明草鱼活性 降血压机素-血管紧素系统Renin-Angiotesin System, RAS 和NO 的调节 在验室建立 Caco-2 胞单层模型模拟 GCP 在小肠中的吸收验期 内21d 胞跨膜电阻(Transepithelial electrical resistane, TEER) 升 385Ω/cm2 表明胞紧密型良好顶侧Apical, AP 和侧Basolateral, BL 碱性磷酸(alkaline phosphatase, AKP) 活性比扩大 1:1.3且AKP 多集中 于状缘AP 小肠类似荧素钠表渗系数Apparent permeability, Papp 0.67×10-6cm/s 在参考值的范围之内胞渗性良好利用模型 模拟从草鱼中纯化的Val-Ala-Pro (VAP) 的合物的小肠吸收样浓 度 1mg/mL渗系数7.66×10-6cm/s 吸收率是20%-70% 属于吸收中等 药物