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第31卷 第6期 江 西 科 学 Vo1.3lNo.6
2013年 l2月 JIANGXI SCIENCE Dec.20l3
文章编号:100l一3679(2013)06—0759—06
●
16SrRNA基 因的PCR—DGGE技术分析
茶尺蠖幼虫肠道细菌种群结构及多样性
靳 亮 ,王金 昌 ,王洪秀2,张贱根。,杨 罡 ,靳海燕
(1.江西省科学院微生物研究所 ,江西 南昌330029;2.江西省农业科学院农业应用微生物研究所 ,江西 南昌330200;
3.江西省蚕桑茶叶研究所,江西 南昌330202;4.山东省新泰市羊流镇杨家庄小学 ,山东 新泰271200)
摘要:利用 16SrRNA的PCR.DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术分析研究了茶尺蠖肠道内细菌的种类与多样
性。通过对 16SrRNA序列分析,从茶尺蠖野外种群肠道 中鉴定了l1种细菌,这些细菌分属于沃尔巴克氏菌
(Wolbachia)、肠杆菌属(Enterobacter)、沙雷氏茵属 (Serratia)、梭菌属 (Clostridium)、肠球菌属 (Enterococcus)、暂
定类群EO1;其中以肠杆菌、沃尔巴克氏菌、沙雷氏菌属最为常见。另外,也鉴定了一种茶树叶绿体上的16S
rRNA基因。茶尺蠖幼虫体 内的共生茵多样性分析结果,将会为害虫综合治理提供一奈全新的探索途径。
关键词:茶尺蠖;肠道细菌;16SrRNA序列;变性梯度凝胶 电泳;多样性
中图分类号:Q968.1 文献标识码 :A
BacterialCommunityinM idgutsofEctropicoblique
LarvaebyPCR—DGGE and 16SrRNA GeneLibraryAnalysis
JINLiang ,WANGJin—chang ,WANG、Hong.xiu ,ZHANGJian—gen ,YANGGang,JIN Hal—yan
(1.InstituteofMicrobiology,JiangxiAcademyofSciences,JiangxiNanchang330029PRC;
2.InstituteofAgriculturalAppliedMicrobioloyg ,
JiangxiAgriculturalAcademyofSciences,JiangxiNanchang330200PRC;
3.InstituteofSericuhureandTea,JiangxiNanchang330202PRC;
4.YangliuTown,YangjiazhuangPrimarySchool,ShandongXintai271200PRC)
Abstract:BacterialcommunityinmidgutsofEctropicobliquelarvaewerestudiedbyPCR—DGGEand
16SrRNA genelibraryanalysis.By16SrRNA V3regiongeneDGGEmethod,elevendistinctbands
wereobtainedfrom 16SrDNA amplificons.Thebandswerepurified,sequenced.Thesequenceswere
alignedwithGenBankdatabaseandshowedthattheywerebelongedto6differentgeneraofbacteria.
PhylogeneticanalysisshowedthatthesequencesofbacteriabelongedtotheWolbachia,Enterobacter,
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