菊花的组织培养技识介绍与讲解.pptx

第六节 主要经济植物组织培养技术一、菊花的组织培养技术二、蝴蝶兰的组织培养技术三、大花蕙兰的组织培养技术四、美国红栌的组织培养技术五、马铃薯的脱毒与快繁技术 蔡艳丽菊花的组织培养技术（一）培养意义 菊花的繁殖可以用播种法、扦插法、分株法、组织培养法。在种苗生产上运用最为广泛的方法是扦插和组培。由于菊花的病毒病种类比较多，而且危害也较为严重。使用扦插繁殖苗，容易引起病毒病的扩张和蔓延，因此茎尖脱毒培养和组培快繁生产母株植株，再生产扦插苗的技术，对优良品种的脱毒和复壮有重要意义。二、培养程序1.外植体的选择与处理2.外植体的清洗、消毒与接种 3.初代培养4.增殖与继代培养 5.生根和移栽 1.外植体的选择与处理 以花序轴为外植体时，选取具有该品种典型特征的，饱满壮实的花蕾，最好是将要开放而没有开放的花蕾，这时花瓣外好象有一层薄膜包围着，里面仍是无菌的，采回实验室后做表面消毒，便于无菌条件下剥离出花序轴。2.外植体的清洗、消毒与接种 材料初步切割后，用洗衣粉水漂洗，再用自来水冲净后，在超净工作台上将其放入70%~75%的酒精中浸润30 s，转入2%次氯酸钠溶液中消毒8～15 min，并不时摇动，最后于无菌水中漂洗3～5次后待用。 茎段从两端切去一小段；花蕾须剥去花被，用中部花瓣或花序轴接种。3.初代培养 在24～26℃，每天12～16 h，光强 1 000～4 000 Lx条件下，外植体经培养后，一般10～20 d茎尖处可分生出新芽，茎段的叶腋处也会萌发出新芽。而花蕾外植体经过15～20 d的培养，会形成愈伤组织；再经过20～30 d的培养，愈伤组织就会分化出较多的丛生芽 。4.增殖与继代培养 将从以上外植体诱导分化出的单芽或丛生芽，分切成数段或数块放入增殖培养基中继代培养。开始分化率和分化苗的数量都较小，随继代次数增加，分生苗很快就能够增多起来。 增殖方法还有：用产生的嫩茎为材料，培养其长到一定高度时，将嫩梢剪成一节带一叶的茎段，然后插入MS或MS+NAA0.1 mg/L的培养基中培养，4～5周后，腋芽即生长成小植株，再照上述方法切剪茎段，重复培养，从而达到快繁的目的。5.生根和移栽 菊花无根苗生根一般较容易，通常在增殖培养时久不转瓶，即可生根，但这种根的根毛较少或无，不利于将来移栽和生长，所以常用下列方法处理： （1）无根苗的试管生根，切取3 cm左右无根嫩茎，转插到1／2MS+NAA(或IBA)0.05 mg/L的培养基中，经10 d左右即可生根，然后移栽驯化。 （2）无根嫩茎直接插植到基质中生根。剪取2～3 cm无根苗，插植到珍珠岩或蛭石的基质中，基质事先用生根激素溶液浸透，l0d后生根率可达95％～100％。6.出瓶苗的过渡管理 菊花的有根苗移栽成活容易，将有根的植株从瓶中用镊子轻轻夹出，洗净根部黏附的琼脂，栽入蛭石基质中。然后加设小拱棚以保湿，随着幼苗的生长，逐渐降低空气湿度和基质含水量，转为正常苗的管理阶段。移栽前期将空气湿度保持在75%～85%之间，遮光率为40%，环境温度控制在20～26℃，就可使试管苗在20d左右移栽成活，并长出新根新叶。 分化芽二、蝴蝶兰的组织培养技术（一）培养意义 蝴蝶兰属于兰科、蝴蝶兰属，为多年生热带花卉，是世界上栽培最广泛、最受喜爱的洋兰之一。 蝴蝶兰的繁殖大多采用分株的方法，得到种苗量少，不能满足栽培的需求。通过组织培养技术繁育蝴蝶兰种苗，实现“兰花工业”是目前繁殖率最高、种苗质量最优秀的方法。（二）培养程序二、培养程序1.外植体的选择 2.外植体的处理、接种与初代培养3.增殖与继代培养 4.壮苗与生根培养 5.驯化移植 1.外植体选择 蝴蝶兰的组织培养外植体有茎尖、茎段、叶片、花梗腋芽、花梗节间、根尖等，各部位都能诱导成功，只是难易程度不一。 用花梗腋芽或花梗节间作外植体，容易诱导，外植体表面灭菌成功率高，是最合适的外植体取样部位。2.外植体的处理、接种与初代培养 花梗腋芽的培养：剪取整枝花梗，清水冲洗30 min，将花梗剪成长约2～3 cm带腋芽的切段，用无菌吸水纸或纱布吸干水分，带入无菌操作室按无菌操作程序进行接种。先用70%的酒精溶液浸泡30 s，再用0.1%的升汞溶液浸泡8～10 min，用无菌水反复冲洗5～8次，接种在MS+BA 3 mg/L的培养基上，可使腋芽萌发为丛生芽。 花梗节间的培养： 取生长期在45 d以内的蝴蝶兰花梗，经无菌操作消毒后，（消毒方法同花梗腋芽）斜切成1～1.5 mm厚的薄片，平放在固体培养基上。培养温度24～28℃，光照强度500 Lx，每天光照16 h培养。培养基用1.2倍的VW无机盐配方，加肌醇100 mg/L，维生素B1、B6和烟酸各0.5 mg/L，BA1 mg/L，蔗糖2%。形成原球茎快而多。3.增殖与继代培养 原球茎的增殖培养基以MS+