青枯雷尔氏菌GMI1000菌株龙胆酸1,2-双加氧酶活性中心关键氨基酸残基的鉴定.pdfVIP

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2018-04-16 发布于北京
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青枯雷尔氏菌GMI1000菌株龙胆酸1,2-双加氧酶活性中心关键氨基酸残基的鉴定.pdf

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应用与环境生物学报2007，13(6)：863～867 Chin Environ JAppl Biol=ISSN1006-687X IdentificationofCritical for Residues ofaGentisate Activity fromRalstonia 1．2-dioxygenase solanacearumGMIlOOO+ LIU Shunnil，2NIJinrenl，2 Dongqil’2一．ZHU Sciencesand (‘CollegeofEnvironmental 100871，China) Engineering，PekingUnivemity，Beijing Graduate (2ShenzhenSchool，PekingUniversity，Shenzhen518055，Guangdong，China) AbstractLocusRScl087of thechromosomefromasoil—borne solanacearumGMIl000 Gram·negtivebacterium，Ralstonia was toencodea the ofbioinformatics．Itwasclonedand inEsche— putative l，2-dioxygenase gentisate by analysis overexpressed richiacoli．The was theharvested af- to from cellextracts resultingproductincorporateda(His)6tag purifiedhomogeneity by confirmed finitychromatograhpy．Enzymeassays thatRScl087encodeda showedthat gentisate1，2-dioxygenase．SDS—PAGE the exhibitedan molecularmassof38x revealedthat polypeptide 103．Site．directed Hisl05．Hisl07 approximate mutagenesis andHisl46werethecrucialresiduesinvolvedinthe of R．