GB 6 432 饲料粗蛋白.pdf

中华人 民共和 国国家标准 饲 料 中 粗 蛋 白测 定 方 法 GB/T 6432一94 Methodforthedeterminationof crudeproteininfeedstuffs 代替GB6432一66 本标准参照采用I[SO5983-1979动《物饲料一氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。 主腼内容与适用范围 本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。 引用标准 GB601化学试剂 滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备 原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸钱。加入 强碱进行蒸馏使氨逸出，用砚酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗 蛋白含量。 4 试剂 4.1 硫酸(GB625):化学纯，含量为98%，无氮。 4.2混合催化剂:0.4g硫酸铜，5个结晶水(GB665),6g硫酸钾(HG3-920)或硫酸钠(HG3-908), 均为化学纯，磨碎混匀。 4.3 氢氧化钠(GB629):化学纯，40%水溶液(M/V)o 4.4 硼酸(GB628):化学纯，2%水溶液(MY). 4.5 混合指示剂:甲基红(HG3-958)0.1%乙醇溶液，澳甲酚绿(HG3-1220)0.5%乙醉溶液，两溶液 等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。 4.6 盐酸标准溶液:邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。 4.6.10.1mol/L盐酸(HCl)标准溶液:8.3mL盐酸(GB622)，分析纯，注入1OOOMI蒸馏水中。 4.6.2 0.02mol/L盐酸(HCl)标准溶液:1.67ml,盐酸(GB622)，分析纯，注入1OOOml蒸馏水中。 4.7蔗搪(HG3-1001):分析纯。 4.8 硫酸钱(GB1396);分析纯，千燥。 4.9 硼酸吸收液:I%硼酸水溶液1OOOmL，加入。I0o溟甲酚绿乙醇溶液10mL,0.1写甲基红乙醇溶 液7mL,4%氢氧化钠水溶液。5mL,混合，置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。 仪器设备 5.1 实验室用样品粉碎机或研钵。 国家技米监督局1994一07一18批准 1995一01一01实施 GB/T 6432一 94 5.2 分样筛:孔径0.45mm(40目)。 5.3分析天平:感量。，0001ge 5.4 消煮炉或电炉 5.5滴定管:酸式，10,25mL, 5.6凯氏烧瓶:250mL, 5.7 凯氏蒸馏装置:常量直接蒸馏式或半微量水燕气蒸馏式。 5.8锥形瓶:150,250mL, 5.9 容量瓶:100mL, 5.10 消煮管:250mL. 5.1， 定氮仪:以凯氏原理制造的各类型半自动，全自动蛋白质测定仪。 6试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试 样成分的变化。 7 分析步蕊 了.，仲裁法 7.1.1 试样的消煮 称取试样。5-1g(含氮量5^80mg)准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶(5.6)中，加入6.4g混合 催化剂(4.2)，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸(4.1)和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶(5.6)置于电炉 (5.4)上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力(360^410℃)直至呈透明的蓝绿色，然 后再继续加热，至少2h, 7门.2 氨的蒸馏(蒸馏步骤的检验见附录A) 7.1.2.1 常量蒸馏法 将试样消煮液(7.1.1)冷却，加入60^-100mL蒸馏水，摇匀，冷却。将蒸馏装置(5.7)的冷凝管 末端浸入装有25mL硼酸(4.4)吸收液和2滴混合指示剂(4.5)的锥形瓶内。然后小心地向凯氏烧瓶 (5.6)中加入50mL氢氧化钠溶液(4.3)，轻轻摇动凯氏烧瓶(5.6)，使溶液混匀后再加热蒸馏，直至 流出液体积为100mL。降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1-2min，并用蒸馏水冲洗冷凝 管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏. 71.2.