花青素合成调节基因B1_C1转化东方百合‘索邦’的研究.pdfVIP

第37卷摇 第11期 北 京 林 业 大 学 学 报 Vol.37,No.11 2015年11月 JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY Nov. ,2015 鄄鄄 DOI:10.13332/ j.1000 1522 花青素合成调节基因B1/ C1转化东方百合‘索邦爷的研究 1 2 1 1 1 崔摇 祺摇 杜运鹏 摇 魏摇 迟 摇 高摇 雪摇 贾桂霞 (1花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室,国家花卉工程技术研究中心,北京林业大学园林学院 2 北京市农业生物技术研究中心,北京市农林科学院) 摘要:百合是全球著名的切花商品花卉,较低的遗传转化效率限制了百合转基因育种的发展,建立高效、稳定的遗 传转化体系对于培育转基因新品种至关重要。 外源花青素合成调节基因的表达可使花青素在植物细胞内积累,使 植物体外观上表现出色彩的变化,易于观察,因此可作为报告基因用于植物转基因研究,快速报告细胞、组织、器官 或植株是否被转化。 本文以东方百合‘索邦爷无菌苗鳞片为受体材料,利用农杆菌介导法将花青素合成调节基因 B1/ C1导入‘索邦爷中。 通过草甘膦敏感性试验,确定了草甘膦筛选的质量浓度为2郾1mg/ L,对农杆菌介导的遗传 转化体系进行了优化,研究了侵染液及共培养基成分对抗性芽诱导率的影响,以MS培养基为基本培养基,设置了 7种类型改良MS培养基。 结果表明:当MS培养基中去除大量元素时,抗性芽获得率相对较高,可达(18郾31依 1郾71)%。 在此条件下,将培养基中30 g/ L 的蔗糖替换成70 g/ L 的麦芽糖,可使抗性苗诱导率增至(22郾27 依 3郾48)%。 热激和超声波结合使用能够明显提高抗性苗的获得率,其中以42益热激1郾5min、120W超声波超声20s 抗性苗获得率最高,可达(26郾80依2郾24)%。 抗性植株经PCR和Southern检测,获得了1株单拷贝转基因植株,初 步证明B1/ C1基因已整合到‘索邦爷基因组DNA 中,并且转基因植株叶片、叶柄、鳞茎的花青素含量均高于非转基 因植株,说明花青素合成调节基因B1/ C1在转基因百合中获得了表达。 关键词:百合;花青素;调节基因B1/ C1;遗传转化 鄄鄄 鄄鄄 鄄鄄 中图分类号:S682郾2摇 摇 文献标志码:A摇 摇 文章编号:1000 1522(2015)11 0100 09 1 2 1 1 1 CUI Qi ; DU Yun鄄peng ; WEI Chi ; GAO Xue ; JIA Gui鄄xia . Transformation of Lilium ‘Sorbonne爷 (oriental hybrids) with anthocyanin regulatory gene B1/ C1. Journal of Beijing 鄄鄄 Forestry University (2015)37(11) 100 108 [Ch,36 ref.] 1Beijing Key Laboratory of Ornamental Plants Germplasm Innovation Molecular Breeding,National Engineering Research Center for Floricul