临床输血检测操作规程完整.doc

WORD格式可下载 专业技术资料 编辑整理分享 文件类型：作业指导书 文件编号：JCXRMYY -JY-015-2009 文件名称：临床输血检测操作规程 第01版第0次修改 第1页共12页 ABO 血型鉴定 1、测定原理 根据红细胞上有或无 A 抗原或／和 B 抗原，将血型分为 A 型、B 型、AB 型及 O 型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正 定型，是用已知抗—A 和抗—B 分型血清来测定红细胞上有无相应的 A 抗原或／ 和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A 或／和抗—B。 2、标本种类及收集要求 2.1 受检者血清； 2.2 枸缘酸钠抗凝血或未稍取血，受检者血液制成5 ％红细胞盐水悬液使用， 制备方法见本节附注。 2.3 标本出现中度溶血者，为不合格标本，不能用于检测。 3、仪器、试剂、校准品、质控品、培养基、以及其他所需物品 抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）：河北医科大学生物医学工程中心， 产品注册号：国药准字包装:抗A、抗B各1支/盒，塑料瓶，规格： 10ml/支，储存要求：2℃～8℃避光保存，主要成分：分泌抗人 A 型和抗人 B 型 血型原单抗的杂交瘤细胞培养上清液并补加一定量小鼠腹水抗体。0.9/%的生理 盐水：江西科伦医药有限公司。离心机，显微镜。 4、操作步骤 4.1、试管法 4.1.1 取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A 十 B，用滴管分别加抗—A、抗—B 和抗—A 十 B 分型血清各 l 滴（约 50 ul） 于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。 4.1.2 另取洁净小试管(内径 10mm×60mm)3 支，分别标明 A、B 和 O 细胞。用 滴管分别加入受检者血清 l 滴于试管底部，再分别以滴管加入 A、B和O型5 33％试剂红细胞悬 液l滴，混和。 4.1.3 立即以1000r／min离心 3 min。 4.1.4 将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或 溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。 4.1.5 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、 类B或cisAB的发现。 ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 编制人/修改人： 校核人： 审核人： 批准人： 批准日期： 年 月 日 实施日期： 年 月 日 文件类型：作业指导书 文件编号：JCXRMYY -JY-015-2009 文件名称：临床输血检测操作规程 第01版第0次修改 第2页共12页 4.1.6 凝集强度判断标准 4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3+ 红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。 2+ 红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。 1+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 ± 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。 MF 混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集，而 极大多数红细胞仍呈分散分布。 - 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。 4.2 玻片法 4.2.1 取清洁玻片 1 张(或白瓷板 1 块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B 和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴于标明的 方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。 4.2.2 另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B 细胞和 O 细胞，用滴管各加受检者血清 1 滴，再分别用滴管滴加