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朊粒蛋白分子量为的单体称为朊粒蛋白含四个螺旋几乎没有折叠而链上有变构转换成四个折叠微生物检验标本采集以检测蛋白酶抗性的为诊断标志取脑脊液和病变组织等标本应立即检测或冻存待用非固定标本用做免疫印迹固定标本用作染色镜检或做免疫组化检测标本直接检查电子显微镜检查羊瘙痒病相关纤维是朊粒感染的标志之一有两种存在形式型纤维直径为型纤维直径为目前诊断朊粒感染的依据主要依赖神经病理学检查海绵状病变稀疏地分布整个大脑皮层神经元消失星状细胞增生典型病变为融合性海绵状空泡空泡周围有大量淀粉样斑块用和染色清晰可见淀粉斑
朊粒蛋白( PrP ) 分子量为27-30kd的单体,称为“朊粒蛋白”(PrP)。 PrPC含四个α-螺旋,几乎没有β-折叠。而PrPSC链上有变构,转换成四个β-折叠。 微生物检验 1.标本采集 以检测蛋白酶抗性的PrPRES为诊断 标志,取脑脊液和病变组织等标本, 应立即检测或冻存待用,非固定标 本用做免疫印迹,固定标本用作染 色镜检,或做免疫组化检测。 标本直接检查 1.电子显微镜检查 羊瘙痒病相关 纤维(SAF)是朊粒感染的标志之一。 有两种存在形式: I型纤维直径为 11~14nm,Ⅱ型纤维直径为27~34nm。 2.目前诊断朊粒感染的依据主要依 赖神经病理学检查,海绵状病变稀 疏地分布整个大脑皮层,神经元消 失,星状细胞增生,典型病变为融 合性海绵状空泡,空泡周围有大量 淀粉样斑块,用 HE和PAS染色清晰 可见。PrP淀粉斑也是朊粒的特异标 志, CJD病人中约有10%阳性。 3.快速简易的免疫学方法 prpSC是人朊粒感染的特异标志,用 病人的脑组织经蛋白酶有限消化去除 正常细胞的PrPC,然后用斑点免疫 或蛋白质免疫印迹检测PrPSC。 4.PrP基因检测 取病变神经组织细胞或外周血白细胞 测定第20号染色体短臂上的PrP基因 序列,可诊断遗传型朊粒感染性疾病。 用PCR扩增出PrP全基因,用位点特异 性的寡核苷酸探针杂交,筛选出突变 基因,再进行序列分析,找出PrP基 因突变的位点。 5.朊粒的分离 可用猴、羊、豹、猫及豚鼠等动物进 行感染试验,但用动物分离人朊粒成 功率较低,最近制备的含有人PrP基 因的转基因小鼠对人朊粒敏感,但用 动物分离朊粒的时间的较长,一般需 200天以上,不适于实验室检查。目 前仍以病理检查作为诊断朊粒感染的 手段。 Prusiner等应用化学方法提纯瘙痒病原因子, 分离得到了具有高度感染性的组分— 一种分 子量为27-30kd的特殊糖蛋白,将其定名为“ 糖蛋白侵染子”(缩写为prion)过去的中文 译名为朊病毒,现译为朊粒,其对应的单体 称为“朊粒蛋白”(PrP)。
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