病原学诊断与防治讲义教材.ppt

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第一篇 微生物学基础;Outline;Date;Assays;Laboratory Diagnosis for Bacterial Infections; ;病原菌的检查程序;Bacteriological Diagnosis;Morphological;Date;Date;Date;Date;Date;Date;Isolation & Culture: Colony;;Date;分离培养 isolation and cultivation; 厌氧罐 厌氧袋;Biochemical Reactions;Serological Assays;基本原则 ①用已知抗体检测未知抗原; ②用已知抗原检测未知抗体。 最简易的方法有玻片凝集等试验。 常用的方法有:凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、ELISA、免疫荧光等。;Animal experiment;Virulence Test;Antibiotic Susceptibility Test;MIC & MBC;Date;Bacterial Proteins, DNA & RNA;Detection of Bacterial Antigens;Date;Date;Bacterial DNA & RNA ;Date;Date;PCR;分子生物学技术 molecular biological techniques; PCR 是一种无细胞的分子克隆 技术,能在体外将一个基因或 一段DNA 序列经过多次循 环的DNA复制,在数小时内扩 增上百万倍。既便于基因诊断,又利于 研究。;Date;Gene Chip / microarray;Diagnosis Strategy for Bacterial Infection;第25章 病毒感染的诊断 P238 Laboratory Diagnosis for Viral Infection; 病毒感染的检测;Morphological ;Date;二、病毒分离培养 病毒分离的一般程序是 ;Isolation and Culture;Cell culture;Date;Type of Cultured Cells;Indications of Viral Propagation;Date;Date;(1)原代细胞培养: 动物或人组织直接用蛋白酶消化所得的细胞 经体外培养后可贴壁或悬浮生长。 (2)二倍体细胞株: 在体外连续培养50~60代仍保持其二倍染色体数目的单型细胞。; 临床病毒实验室常用的细胞培养 ;识别病毒增殖的方法 (1)细胞病变效应(CPE):溶细胞型病毒感染细胞后,可出现细胞团缩、裂解或细胞肿大、数个细胞融合成多核巨细胞或细胞聚集成葡萄串状、脱落或死亡等。;epithelial cells - adenovirus;Negri Body;(2)红细胞吸附:流感病毒和某些副粘病毒感染细胞后24~48小时,细胞膜上出现病毒的血凝素,能吸附豚鼠、鸡等动物及人的红细胞,发生红细胞吸附现象。 (3)干扰现象; 病毒量测定 (1)测定病毒数量可用空斑形成单位(PFU)表示。一个空斑是标本中一个病毒大量复制所致,有感染性的病毒经适当稀释后接种于单层细胞,由于单个病毒的???制增殖使局部单层细胞脱落,此即空斑。经染色后空斑可用肉眼观察,计算空斑数即可计数病毒数量。;PLAQUE ASSAY;PLAQUE ASSAY;PLAQUE ASSAY;三、光学显微镜和电子显微镜 1、光学显微镜:观察病毒的包涵体;2、电子显微镜:直接观察病毒;Viral Quantity Determination;Date;Plaque;Differences between viral particle (VP), plaque formation unit (PFU);Proteins and Nucleic Acids;Virus-specific Antibodies;三、病毒感染的血清学诊断方法 P240 1、中和试验 2、补体结合试验 3、红细胞凝集和凝集抑制试验 ;ELISA for HIV antibody;Date;Diagnosis Strategy for Viral Infection ;Rapid Diagnosis for Viral Infection;小 结;第四节 特异性预防与治疗 Prevention Principles ;特异性免疫的分类;一、人工免疫(artificial immunization);人工免疫:采用人工方法将疫苗、类毒素等或含有某种特异性抗体、细胞免疫制剂等接种于人体,以

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