激光扫描共聚焦显微镜操作手册.doc

北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书 激光扫描共聚焦显微镜 （A1R-si） 操 作 指 南 北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书 目 录 ? 第一章：Ti-E 显微镜操作 2-7 ? 显微镜光路调节和照明注意事项 6 ? Ti-E 物镜，DIC 插片，DIC 棱镜对照表 7 ? 第二章：共聚焦开关机 8-10 ? 第三章：共聚焦图像拍摄11-38 ? NIS-Elements C 软件开启和操作界面简介11-15 ? NIS-Elements C 的实时图像获得基本操作 16-23 ? 图像拍摄 24-27 ? 探测模式（标准探测器）设置 28-38 ? 第四章: 图像的保存和查看 39-42 ? 第五章：图像分析 43-46 ? 附件一、多维拍摄功能和操作方式介绍 47-51 ? 附件二：图像格式批量转换操作 52-53 - 1 - 北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书 第一章 Ti-E 显微镜操作指南 （一） 认识显微镜各个部件 （1）滤光片：包括 D---毛玻璃；NCB---色温 （8）滤色块转盘（包括 DIC 检偏器）； 平衡片；ND---减光片；“GIF”---绿色滤 （9）手动荧光光闸； 光片和用于 PFS 的红外滤光片； （10） 电动焦距调节旋钮； （2）视场光阑； （11） ND 减光片； （3）聚光器升降旋钮； （12） 遥控器； （4）起偏器（DIC 用）； （13） 透射光电源； （5）聚光器对中旋钮； （14） 汞灯荧光光源； （6）孔径光阑； （15） PFS 控制器 （7）聚光器模块（包括明视场，DIC）； （16） HUB 控制器 - 2 - 北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书 遥控器示意图(根据具体配置有些图标可能不显示) 1） 物镜切换按钮； 2） 滤光块，DIC 检偏器切换按钮； 3） DIC 检偏器快速切换按钮； 4） 光路端口切换按钮； 5） PFS 开关控制按钮； 6） 聚光器转盘切换按钮； 7） 透射光源控制按钮*。 *请注意：CNTL 按钮灯亮，则可以通过遥控器或电脑控制软件来调节透射光源强度，此时显微 镜底座左侧光源开关和调节旋钮锁定；CNTL 功能关闭，可以通过显微镜底座开关和旋钮来控制 透射光源。 3 北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书 前面板示意图 1） 状态显示屏； 2） PFS 开关按钮和 PFS 聚焦状态指示灯（需要选购 PFS 部件）； 3） 光路端口切换按钮； 4） 中间变倍旋纽； 侧面板示意图 1） 调焦旋钮 2） 粗微调切换按钮 3） 物镜切换按钮； 4） 滤光块，DIC 检偏器切换按钮 5） 透射光光源开关（当遥控器透射光源控制按钮打开时，此按钮无效）； 6） 透射光量度调节旋钮（当遥控器透射光源控制按钮打开时，此旋按钮无效）； 7） 物镜复位； 8） 物镜向下移动 2 毫米； 注意：在使用显微镜之前，要把主机底座右后端的黑色 HUB 控制器（显微镜示意图 15 位置） 右侧的电源开关打开。 4 北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书 （二） 明视场透射光操作要点 1） 打开电源开关，并打开显微镜透射光卤素灯电源开关； 2） 把滤色块移到空位； 3） 把起偏器，检偏器移出光路； 4） 把聚光器转盘切换到 A 状态； 5） 检查柯勒照明（柯勒照明调节方法参看附录 1）； 6） 检查出光端口。 （三） 微分干涉(DIC)操作要点 1） 按照明视场透射光观察方法调节好显微镜； 2） 把起偏器，检偏器移入光路； 3） 按照相对应物镜将聚光器镜转盘转到相应 N1/N2 位置（请参见另外所附对照表）； 4） 检查出光端口； 5） 旋转起偏器，选择最佳显示效果。 （四） 荧光观察操作要点 1） 打开荧光电源稍待片刻至光源指示灯不闪；（打开约 10min 稳定，关闭需要超过 15min 后才可以再次启动） 2） 确认透射光开关处于关闭状态； 3） 检查出光端口； 4） 选择合适的滤色块； 5） 打开光闸（汞灯面板的 shutter 旋钮），调节荧光亮度（汞灯面板的 ND 旋钮），进行观察； 6） 不观察时，把光闸关掉，以避免荧光淬灭。 注意：该系统配置透射和荧光光闸，在做相应操作时，应将对应光闸打开。光闸开关可在遥 控器上设定。 落射光照明 光闸按钮 透射光光闸 按钮 汞灯光闸按钮 （电动型号） 5 北京大学化学学院中级仪器实验室 A1R 操作说明书 显微镜光路调节和照明注意事项 （一） 柯勒照明的调节方法 1） 选择 10X 物镜； 2） 调焦，使标本清晰成像； 3） 缩小视场光阑（显微镜视图 2 位置）； 4） 上下调节聚光器（显微镜视图 3 位置），使视场光阑边缘清晰； 5） 调