乙肝两对半标准操作规程.pdf

乙肝五项（乳胶法）操作规程 POS 1.检测目的 乙型肝炎病毒标志物 (HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb) 检测。 2.测定原理 HBsAg检测采用双抗体夹心法原理， 试剂含有被事先固定于膜上 测试区（ T 区）的抗体。检测时，标本滴入试剂加样处，标本与预包 被的乳胶颗粒（即标记物）结合的 HBsAb （即标记抗体）反应，该结 合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，乳胶抗体（标记抗体） 在层析过程中先与标本中的 HBsAg 结合，随后结合物会被固定在 T 区膜上的 HBsAb捕获，形成 HBsAb标记抗体 -HBsAg-HBsAb复合物， 从而在 T 区形成一条红杠。如为阴性，则 T 区没有红杠。 HBsAb检测采用双抗原夹心法原理， 试剂含有事先固定于膜上测 试区（ T 区）的 HBsAg。检测时，标本滴入试剂加样处，标本与预包 被的乳胶颗粒结合的 HBsAg反应 （即标记抗原）反应，该结合物随之 在毛细效应下向上层析。如是阳性，乳胶抗原（标记抗原）在层析过 程中先与标本中的 HBsAb 结合，随后结合物会被固定在 T 区膜上的 HBsAg捕获，形成 HBsAg标记抗原 -HBsAb-HBsAg复合物，从而在 T 区形成一条红杠。如为阴性，则 T 区没有红杠。 HBeAg检测采用双抗体夹心法原理。 试剂含有事先固定于膜上测 试区（ T 区）的 HBeAb。检测时，标本滴入试剂加样处，标本与预包 被的乳胶颗粒结合的 HBeAb 反应（即标记抗体）反应，该结合物随 之在毛细效应下向上层析。如是阳性，乳胶抗体（标记抗体）在层析 过程中先与标本中的 HBeAg 结合，随后结合物会被固定在 T 区膜上 的 HBeAb捕获，形成 HBeAb标记抗原 -HBeAg-HBeAb复合物，从而在 T 区形成一条红杠。如为阴性，则 T 区没有红杠。 HBeAg、HBcAb 采用竞争抑制法原理，试剂含有事先固定于膜上测试区（ T 区）的抗 体。检测时，标本滴入试剂加样处， 随之标本在毛细效应下向上层析。 如标本中含有相应的抗体， 则同膜上测试区 (T)的单克隆抗体竞争， 与 预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。 如标本中没有相应的抗体， 则 预包被在乳胶颗粒上的相应抗原与膜上测试区 (T) 的单克隆抗体全部 结合。 阳性标本，测试区 (T)将没有红色条带；阴性标本，测试区 (T) 会出现明显的红色条带。 3.标本采集 样本采集后应尽快分离血清或血浆以避免溶血。 检测进应尽量使 用新鲜的样本。样本若不能及时送检，可在 2-8℃冷藏 3 天。长期保 存需冷冻于 -20℃，忌反复冻融。发臭、溶血等异常样本请勿使用。 4.试剂 艾博生物医药有限公司 5.操作步骤 5.1 使用前将试剂板和血清／血浆标本恢复至室温 (20～30 ％)。 从原包装铝箔袋中取出试剂盒 (注意：在扣开铝箔前应先恢复至室温 )， 在 1 小时内应尽快地使用。 5.2 将试