研发部岗前课件.pptx

牛血清细胞培养技术中文名称： 胎牛血清 英文名称： fetal calf serum 定义： 采自胎牛的血清。含有多种生长因子，常用于体外细胞培养。一、胎牛血清各项质量指标符合2005版《中华人民共和国药典》第三部附录的要求。1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量 3.5%～5.0%（ w/v）3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）4、无菌检验　 阴性5、支原体检验　 阴性 6、/view/925084.htm细菌内毒素 ≤5（EU/ml） 7、牛腹泻病毒 阴性8、大肠杆菌噬菌体 阴性 9、支持/view/418191.htm细胞增殖(Sp2/0-Ag14)　/view/725321.htm生长曲线（接种浓度）最大增殖浓度≥2.5×106 个/ml细胞倍增时间 ≤15h 克隆率 ≥85%血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、/view/83652.htm多肽、/view/16.htm脂肪、/view/184.htm碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进/view/1160417.htm细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。功能牛血清是/view/44478.htm细胞培养中用量最大的/view/585465.htm天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于/view/1235793.htm动物细胞的/view/3873512.htm体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、/view/119056.htm脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下/view/1398892.htm结合蛋白质能与有毒金属和/view/207960.htm热原质结合，起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度/view/901429.htm缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。胎牛血清与小牛血清不同点1、来源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。组份与比例不同：两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。　　血清保存和使用须注意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时 ，应先将血清至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加，血清在解冻和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。2、胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三种之间的区别：这三种血清的成份，总体没有什么明显差别，只是有一些成分与其生存环境有关，如上述有人说的抗体很等少。此外，因生长发育的需要，有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。3、最为重要的一点是：胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要比后两者好。4、根据牛出生时间和血清采制分离方法分为：（1）胎牛血清：八月龄胎牛心脏穿刺取血;（2）新生牛血清：出生12-24小时新生牛静脉采血;又可细分为：a.高级新生牛血清：采血后静置自然析出的血清;b.标准新生牛血清：c.经离心分离的血清;d.普通新生牛血清：融血或微融血的血清;（3）小牛血清：出生三月龄小牛动脉采血分离血清; 血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究