人感染高致病性禽流感标本采集及实验室检测技术方案.pdf

附件2 人感染高致病性禽流感标本采集及实验室检测技术方案 为及时、科学地采集和运送人禽流感病例或疑似污染环境等各种类型的标 本，规范实验室检测程序和检测方法，提高检测质量，明确诊断或开展相关科学 研究，特制定本方案。 1 采集对象 1.1 人禽流感医学观察病例、疑似病例、临床诊断病例及需要进一步研究 的确诊病例。 1.2 其它需要进行人禽流感诊断或排除者。 1.3 需要采集的环境标本。 2 采集要求 2.1 从事人禽流感检测标本采集的技术人员必须经过生物安全培训和具备 相应的实验技能。在标本采集过程中，采样人员参照（附件5）规定的防护措施 进行安全防护。 2.2 住院病例的标本由所在医院医护人员在当地疾病预防控制机构专业人 员指导下采集。 2.3 标本采集具体种类和数量由现场工作组确定。 2.4 密切接触者标本由当地疾病预防控制机构负责采集。 2.5 根据实验室检测工作的需要，结合病程再次采样。 3 标本种类 每个病例应尽可能同时采集上、下呼吸道标本；需要排除人禽流感的死亡 病例则依据《传染病病人或疑似传染病病人尸体解剖查验规定》（中华人民共和 国卫生部令第 43 号）的规定采集尸体标本，没有条件进行尸体解剖的，可采集 呼吸道灌洗液或经皮穿刺采集肺组织标本。 3.1 上呼吸道标本：包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、深咳痰 液。最佳采集时间为发病后3天内。 3.2 下呼吸道标本：包括呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺组织活检标本。 3.3 尸检标本：病人死亡后应依法尽早进行解剖，在严格按照生物安全防 护的条件下，进行尸检，主要采集肺、气管组织标本，条件允许下也可采集肝、 肾、脾、心脏、脑、淋巴结等组织标本。 3.4 血清标本：每一病例必须采集血清标本，须采集急性期、恢复期双份 血清。第一份血清应尽早（最好在发病后7天内）采集，第二份血清应在发病后 1 第3～4周采集。采集量要求5ml，以空腹血为佳，建议使用真空采血管。 3.5 其它标本：如果病例有腹泻症状，可在发病后采集粪便标本；有胸水 者可采集胸水标本。 4 标本采集方法 4.1 咽拭子：用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽 后壁，将拭子头浸入含3ml采样液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。 4.2 鼻拭子：将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停 留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集 另一侧鼻孔。上述两根拭子浸入同一含3ml采样液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。 4.3 鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取 粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。 将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出， 收集抽取的粘液，并用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小孩导尿管接在50ml 注射器上来替代收集器）。 4.4 咽漱液：用10ml不含抗菌素的采样液漱口。漱口时让患者头部微后仰， 发“噢”声，让洗液在咽部转动。然后将咽漱液收集于50ml无菌的螺口塑料管中。 无条件的可用平皿或烧杯收集咽漱液并转入10ml螺口采样管中。 4.5 深咳痰液：要求病人深咳后，将咳出的痰液收集于50ml含3ml采样液的 螺口塑料管中。 4.6 呼吸道灌洗液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约30cm 深处），注入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的 粘液，并用采样液涮洗收集器1次（亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代 收集）。 4.7 胸水:在B超定位下进行胸腔穿刺，抽取胸水5ml，置于无菌的塑料螺口 管中。 4.8 肺组织活检标本：在超声或X线定位下,经皮穿刺取肺组织活检标本,置 于含3ml采样液的塑料螺口管中。 4.9 尸检标本：每一采集部位分别使用不同消毒器械，以防交叉污染；每 种组织应多部位取材，各部位应取20～50g，淋巴结取2个。 4.10 粪便标本：采集5～10g粪便置于含5～10ml采样液无菌螺口管中，严 格密封。 4.11 血清标本：用真空负压采血管采集血液标本5ml，室温静置30分钟，