药品品微生物.ppt

31 药品微生物的检测内容 ? 局限性 无菌：不含任何活得微生物 无菌保证水平 （ sterility assurance level, SAL ） 无菌检验 灭菌工艺 GMP 管理 质量保证体系 32 ? 1 、微生物限度检查的概念与意义 ? 微生物限度检查是指非规定灭菌制剂及其原料、 敷料受到微生物污染程度的一种检查法。允许 一定限量的微生物存在，但不得存在可疑致病 微生物。 ? 微生物限度检查是 药品卫生质量 的一个重要依 据；也是 药品生产企业管理和质量体系评审 的 一个重要手段，反映药品生产工艺的科学性、 合理性和质量管理水平。 （二）微生物限度检查 33 ? 2 、微生物限度检查的方法 ? 包括 细菌总数、霉菌及酵母菌和控制菌 的检测 ? 细菌菌落总数、霉菌和酵母菌菌落总数测定： 这是检测药品质量的一个重要指标，也是对药 品原料、生产工艺、生产环境以及操作人员卫 生状况进行卫生学综合评价的依据之一。 34 ? 控制菌的检查： 非规定灭菌药品中不得检出的 菌类成为控制菌。药品中不允许污染致病微生 物，每种药品通过分析某种致病微生物存在的 可能性，从而确定其控制菌。 ? 我国规定的药品控制菌包括 大肠埃希菌、沙门 菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和破伤风梭菌 等。 在检验同时需用标准菌株作对照试验。 35 ? 3 、微生物限度检查的结果判定 ? 如果供试品的细菌数、霉菌和酵母菌数以及控 制菌 三项检测结果符合 该品种规定，则判定为 合格；若其中 任何一项不符合 规定，则判定为 不合格。 ? 控制菌或其他致病菌 的检测，按一次检出结果 为准， 不再复试 ； 细菌数、霉菌和酵母菌数 ， 其中任何一项不符合规定，应从同一批样品中 随机抽样，独立复试两次， 以 3 次结果的平均值 报告菌数 。 36 药品微生物的检测内容 ? 结果判定 细菌总数 控制菌 霉菌、酵母菌总数 符合品 种规定 符合 规定 任一项 不符合 品种规 定 不符合 规定 37 药品微生物的检测内容 细菌总数 控制菌 霉菌、酵母菌总数 不符合规定 不复试 任一项 不符合 品种规 定 独立复 试 2 次 报告平 均值 ? 结果判定 38 ? 1 、细菌内毒素和热原质检查的概念与意义 ? 细菌内毒素，是 G(-) 菌细胞壁脂多糖中的类脂 A ， 内毒素为 外源性致热原 ，它可激活中性粒细胞 等，使之释放出一种内源性热原质，作用于体 温调节中枢引起发热。 当内毒素通过消化道进 入人体时并不产生危害，但内毒素通过注射等 方式进入血液时则会引起不同的疾病 。 ? 内毒素 耐热 ，加热 100 ℃ 1h 不被灭活，必须 160 ℃ 2-4h 或用强酸、强碱、强氧化剂煮沸 30min 才被灭活。 （三）细菌内毒素和热原质的检查 39 ? 热原质：能引起机体发热的物质，可分为 内源性 和外源性热原质 。外源性包括 G(-) 菌内毒素和少 数 G(+) 菌外毒素。内源性热原质来源于机体自身， 如淋巴细胞释放的 IL-1 、 INF- α 和 IFN- β 等内源性 热原质。 ? 热原质可通过一般细菌滤器，但没有挥发性，所 以，除去热原质最好的方法是 蒸馏 。 40 ? 2 、细菌内毒素和热原质检查的方法 ? 细菌内毒素检查法： 1956 年美国人发现鲎血液遇 G(-) 菌内毒素时会产生凝胶，从而创立了鲎试剂检测法。 由于鲎试剂法 简单 ﹑ 快速 ﹑ 灵敏 ﹑ 准确， 目前已广泛 用于临床、制药工业药品检验等方面。 ? “细菌内毒素试验”被称作鲎试验，收载于 1980 年 20 版美国药典。随后英、德、意、日以及中国相继在药 典中收载了这一检查法。细菌内毒素检查法包括 凝胶 法和光度测定法 两种。前者利用鲎试剂与细菌内毒素 产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素，后 者包括浊度法和显色基质（比色）法，系分别利用鲎 试剂与内毒素反应过程中的浊度变化及产生的凝固酶 使特定底物释放出呈色团的多少来定量测定内毒素。 41 内毒素检查法 药品微生物的检测内容 ? 内毒素： G － 菌细胞壁 的组分，是在细菌死亡 破裂后释放出的 脂多糖 成分。 ? 检查法： 鲎实验 鲎是一种海洋节肢动物， 其血液中含有一种有核变形 细胞，这种细胞的胞浆中含 有凝固酶原和凝固蛋白原。 42 原 理 内毒素（ LPS ） 激 活 凝固蛋白原 凝固蛋白