第五章 三帖皂甙类制剂的分析.ppt

常用的显色剂 ① 25 ％磷钼酸乙醇液 ：喷后 140 ℃ , △ 5 ～ 10min, 皂苷元紫蓝色。 5 ％磷钼酸乙醇液：喷后 105 ℃ , △ 5 ～ 10min ，皂苷元紫蓝色 ②、三氯化锑的浓盐酸或氯仿液 : 喷后 90 ℃ , △ 10min ，各皂苷元 呈不同颜色。 ③、硫酸 - 甲醇液 (1:1): 喷后△，显红褐、紫、黄或黑色。 与加热温度有关。缺点是腐蚀性强 , 其他物质也显色。 ④、氯磺酸 - 乙酸 (1: ２ ) 溶液 : 喷后 130 ℃ , △５ min ，各皂苷元呈 不同颜色。如天蓝、粉红等 , 且在紫外光下也呈不同萤光，较灵 敏（可检出１０ －１ ～１０ －３ ug ） , 可用于鉴别和定量。 ⑤、碘蒸汽 : 灵敏度约为１～２ ug ，优点碘易挥发，显色后挥去碘， 斑点可作定量分析。常用于确定斑点的位置。缺点专属性不强 . 。 常用的显色剂 10 ％硫酸乙醇溶液：最常用的显色剂 配制方法： 取 10ml 硫酸 , 用乙醇稀释至 100ml 特点：与加热温度有关；腐蚀性强；其他成分 也可显色 薄层色谱 1. 薄层板的制备 ： 吸附剂的选择 2. 供试液制备 （掌握） : 溶解性 / 对照物溶液的制备 3. 展开剂的选择 ：与被测物结构的极性大小、溶 解度以及吸附剂的活度密切相关 4. 点样 5. 展开 6. 晾干、显色 7. 斑点的检视、薄层鉴别的判断、或定量 8. 薄层板的记录 四、 皂苷类的定量分析 总皂苷测定： 醇提 水饱和正丁醇萃取或大孔树脂吸附 洗脱 测定 - 常用重量法、比色法 皂苷元测定： 总皂苷酸解 苷元 测定 —— 比色法、薄 层色谱法、高效液相色谱法 单体皂苷测定： 薄层色谱法、高效液相色谱法 但在中药制剂中如无特殊原因，应尽量避免将药品 水解后测定水解产物，因为如此测定已不能客观反 应药品自身的质量，更无法进行稳定性考察 总皂苷测定 ? 重量法： 根据皂苷类成分的溶解性进行提取、分 离及纯化后得到总皂苷，恒重、称量，并计算样 品中总皂苷含量。 一般少用，主要用于含皂苷的原料药质量控制。 如甘草浸膏中甘草酸含量测定 ? 比色法 一般指供试品连续 两次干燥或炽灼后 的重量差异在 0.3mg 以下的重 量 总皂苷测定 ? 比色法： 利用皂苷能与某些试剂反应后产生颜色，然后 于可见光区进行比色测定。 ? 显色后能在紫外光区产生吸收，用 UV 测定 ? 专属性差，但反应灵敏、方法简便、易行 ? 常用的显色试剂 ? 测定总皂苷、总皂苷元的含量时，可用单体皂苷或皂苷 元作对照 常用的皂苷显色剂 ① 浓硫酸 测定甾体皂苷的通用试剂。 甾体皂苷常显黄色 (80 ～ 90 ℃反应 30 ～ 60min ）。 ② 高氯酸 测定具△ 5 的苷元 , 因△ 5 不饱和结构与高氯酸在室 温下即可生成黄色。如：薯蓣皂苷元， 10 、 410nm 、 30 内稳定 ,25 ～ 200ug 符合比尔定律 . ③ 浓硫酸－醋酐、硫酸－醋酐－冰醋酸、硫酸－冰醋酸试剂： 主用于检测甾体皂苷。如：人参总皂苷 ,60 ℃、 25min, 520nm 测定 . 甘草次酸在 529nm 测定 . ④ 芳香醛 - 硫酸或芳香醛 - 高氯酸 主用干检测三萜皂苷，甾体 皂苷也可用。需注意控制反应条件 . ⑤ 其他试剂： 如亚甲蓝与甘草酸结合物， 640nm 比色。 2,6- 二丁基对甲酚与甘草酸呈色 ,575nm 比色。 复方丹参片中三七皂苷的含量测定 —— 大孔树脂分离－比色法 ? 复方丹参片 05 版药典： HPLC 法测定丹参酮 IIA ，丹 参酚酸 B ? 大孔树脂： 第三节 三帖皂苷类成分分析 本节要求 1. 了解皂苷的理化性质 2. 熟悉含皂苷类制剂供试液的提取纯化制备方法 3. 掌握含皂苷类制剂的定量测定原理和方法 4. 掌握含皂苷类制剂的定性鉴别的原理和方法 一、概述 二、结构特征及理化性质 三、皂苷 类 成分的定性鉴别 四、皂苷 类 成分的定量分析 五、应用实例 内 容 苷类（ glycosides ）