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第二节 色谱术语;1 分配系数与分配比;分配比 k：质量比，又叫容量因子或容量比;2、基线：在实验条件下，色谱柱仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线称为基线。 3、峰高：色谱峰顶与基线间的垂直距离，以h表示。? 4、保留值： A 死时间tm：不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现峰极大值所需的时间。因为物质不被固定相吸附，故其流动速度将与流动相的流动速度相近： B保留时间tr：试样从进样到柱后出现峰极大点时所经历的时间。 C 调整保留时间tr’： .; 保留时间tr的表达： 时间单位(如s, d, h), 距离单位(如cm)， 体积(ml, l)表示。 tr意义： 色谱法定性的基本依据，但同一组份的tr常受到流动相流速的影响，因此色谱工作者有时用保留体积等参数进行定性检定。;D、死体积VM：指色谱柱内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪中管路和连接头间的空间以及检测器的空间的总和，当后两项很小而可忽略不计时， VM可由 tm与流动相体积流速F0(ml/min)的乘积计算： E、保留体积VR：指从进样开始到被测组份在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相体积。保留体积与tr的关系如右图： F、调整保留体积V’R：某组份VR扣除VM后，称该组份的V’R ，即;G、相对保留值?2,1：某组份2与组份1的调整保留值之比，即： 由于?2,1只与柱温及固定相的性质有关，而与柱径、柱长、填充情况及流动相流速无关，因此，它是色谱法中，如GC、HPLC中，广泛使用的定性数据。 注意：?2,1绝不是两个组份保留时间或保留体积之比 在定性分析中，通常固定一个色谱峰作为标值(s), 然后再求其它峰(i)对这个峰的相对保留值。此时?r,i 可能大于1，也可能小于1。在多元混合物分析中，通常选择一对最难分离的物质对，将它们的相对保留值作为重要参数。在这种特殊情况下，可用符号a表示： 式中t’r,2为下一峰的调整保留时间，所以这时a总是大于1。;H)、分配比 k, 即容量因子： 意义：色谱柱对组份保留能力的重要参数 k与m的关系： 5 区域宽度 色谱主峰的区域宽度是组份在色谱柱中谱带扩张的函数，它反映了色谱操作条件的动力学因素。度量色???峰区域宽度通常有三种方法： A、标准差?：0.607倍峰高处峰宽的一半。 B、半峰宽Y1/2：峰高一半处对应的峰宽。它与?的关系为 C、基线宽度Y：色谱两侧拐点上的切线在基线上的截距。; 色谱曲线的意义： 色谱峰数=样品中单组份的最少个数； 色谱保留值——定性依据； 色谱峰高或面积——定量依据； 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标； 色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。; 两组份完全分离必须满足： A、两组份的分配系数必须有差异； B、区域扩宽的速率应小于区域分离的速度； C、在保证快速分离的前提下，提供足够长的色谱柱。;6 两种色谱理论 塔板理论——热力学因素 速率理论——动力学因素 ; 塔板理论的假设： (1) 在每一个塔板上，可以迅速建立分配平衡 (2) 将流动相看作成脉动（间歇）过程； (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略 (4) 每次分配的分配系数相同。; 将色谱柱视为精馏塔，即色谱柱是一系列连续的、相等的水平塔板组成。 每一块塔板高(plate high)为H。 假设在每一块塔板上，溶质在两相间很快达到分配平衡，然后随着流动相按一个一个塔板的方式向前转移。对一长为L的色谱柱，溶质平衡的次数应为： n称为 理论塔板数 (theoretical plate number)。 与精馏塔一样，色谱柱的柱效 随理论塔板数n的增加而增加，随塔板高H的增大而减小。 ; 色谱柱长：L， 塔板高度：H， 色谱柱的理论塔板数：n， 则三者的关系为： n = L / H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为：;（2） 速率理论-影响柱效的因素;涡流扩散项;分子扩散项; k为容量因子； Dg 、DL为扩散系数。 减小担体粒度，选择小分子量的气体作载气，可降低传质阻力。;分离度;分离度的表达式：; 理论塔板数n 增加柱效 ，可提高分离度 r21 （或α选择因子） 增大r21是提高分离度的最有效方法， 容量因子，分配比;;谱定性、定量方法; 第三节 凝胶过滤色谱 ;GFC是一种纯粹按照溶质分子在流动相溶剂中的体