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研究生签名:玩 导师签章: 7移伞
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万方数据
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目 录 Y2785362
中文摘要 1
英文摘要 ·4
研究论文 多被银莲花总皂甙诱导人涎腺腺样囊性癌高肺转移细胞凋亡 过程中Bcl.2和Bax蛋白的表达及意义
前言?丹lJ舌? 一芍一8
材料与方法 ·10
结果 ·17
附图 ·1 8
附表 ·21
讨论 ·22
结论 ·25
参考文献 ·25
综述Bcl.2基因家族及其抑制剂与肿瘤治疗研究进展 一28 致谢 36
个人简历 37
万方数据
中文摘要多被银莲花总皂甙诱导人涎腺腺样囊性癌高肺转移细胞凋亡过
中文摘要
多被银莲花总皂甙诱导人涎腺腺样囊性癌高肺转移细胞凋亡过 程中Bel.2和Bax蛋白的表达及意义
摘 要
目的:涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC) 是最常见的涎腺恶性肿瘤之一。因其浸润性强和易发生远处转移而严重危 害人类健康,因此探索新的预防治疗方法,提高对涎腺腺样囊性癌的疗效, 是广大学者研究的热点问题。
多被银莲花(Anemone Raddeana Regel)是毛莨科银莲花属植物的根
茎。药理活性研究发现,多被银莲花提取物有抗肿瘤、镇痛、镇静及拼晾
厥作用。我们前期的实验结果表明,多被银莲花总皂甙能够抑制人涎腺腺 样囊性癌高肺转移细胞(Adenoid cystic carcinoma of high pulmonary metastatic,ACC。M)的增殖,并能够诱导其凋亡。目前Bcl.2家族成员Bcl.2 及Bax蛋白在多被银莲花总皂甙诱导ACC.M细胞凋亡的过程中是否起重 要作用,尚未见国内外文献报导。本研究拟对体外培养的ACC.M细胞经 过多被银莲花总皂甙处理后,通过Western Blot方法,检测Bcl.2和Bax
不同时间点的含量,来验证多被银莲花总皂甙诱导ACC.M凋亡过程中 Bcl.2家族成员Bcl.2和Bax蛋白的表达及意义,从而为治疗腺样囊性癌 植物性化学新药的研究提供实验依据。
方法: 1材料
1.1 ACC.M
北京大学口腔医院提供,建立于1995年。 1.2多被银莲花总皂甙
购买于石家庄乐仁堂药店(产地为黑龙江省),于河北医科大学药学 院经溶解与溶剂萃取提纯得到。
2实验方法
2.1药液制备
多被银莲花总皂甙用DMSO溶解制备成20mg/mL储存液,于.20。C冰 箱中保存,使用时用DMSO浓度小于0.001%的培养液稀释。
万方数据
中文摘要2
中文摘要
2.2细胞培养
将10%胎牛血清和链霉素(100ug/mL)、青霉素(100U/mL)放入 RPMll640培养基,置于37。C、5%C02、湿度饱和的恒温箱内培养,每24~ 48小时传1代,用O.04%EDTA和0.25%胰蛋白酶(1:1)混合液消化 并传代。
2.3细胞接种以及药物处理 用消化液将处于对数生长期的细胞消化后制成4.0x106个/mL的细胞
悬液,再将对照组、24h组、48h组、72h组,共四个培养瓶中分别接种2mL 细胞悬液,存放于培养箱。经过24小时细胞贴壁后,再进行药物处理。把 20mg/mL的多被银莲花总皂甙储存液稀释成浓度为50u卧nL的溶液,从培 养箱中取出贴壁后的细胞,把培养液丢弃,于24h,48h,72h各组中分别 加入多被银莲花总皂甙溶液2mL(浓度50ug/mL),对照组加入二甲基 亚砜的RPMll640培养液2mL(浓度5050ug/mL)。待药物作用24、48、72
小时后,提取各组细胞组织蛋白。
2.4提取细胞组织蛋白 将每一组细胞用PBS洗涤两次,用消化液消化后制成细胞悬液,移
入相应EP管中。3000rmp,4。C
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