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《甜菜组培快繁技术规程》
编制说明
一、工作简况
根据国家糖料产业技术体系任务要求及《内蒙古自治区市场监管局关于下达2019年第1批内蒙古自治区地方标准制修订项目计划的通知》(内市监标准字〔2019〕170号)文件精神,由内蒙古自治区农牧业科学院提出并负责《甜菜组培快繁技术规程》地方标准的起草工作。主要起草人:白晨,李晓东,张惠忠,张自强,王良,韩平安,张必周,赵尚敏,付增娟,鄂圆圆,郑文哲,张辉。
二、制定本标准的必要性和意义
甜菜是重要的糖用和饲用作物,是我国两大糖料作物之一,在北方农业中占有重要地位。发展甜菜糖业是提高我国人均食糖和人民生活水平的重要途径。随着人民生活水平的日益提高,对甜菜的育种工作也提出了更高的要求。
目前甜菜品种的培育主要依靠常规育种,其见效慢、周期长、投资高的缺点越来越明显。甜菜在我国种植历史仅有百年左右,种质资源匾乏,遗传背景狭窄。尤其甜菜是异花授粉,高度自交不亲和的作物,在育种研究中发现单株突变,依靠常规方法很难保存下来,而组织细胞培养可以有效地解决该问题。甜菜组织培养植株再生及快速繁殖体系的建立,不仅在育种研究工作中有着重要作用,同时也是以重组为特征的基因工程研究的前提。
近年来,我们在国家现代农业产业技术体系和内蒙古自治区科技重大专项“甜菜生物技术育种体系研究与应用”项目的专项资金支持下,对甜菜组培快繁技术做了系统的研究,明确了甜菜组织培养过程中种球的消毒技术、无菌苗生长过程中所用到的各种培养基的成分。因此通过本标准建立甜菜组培快繁技术,可以为甜菜育种工作提供新的手段,加强组培快繁技术与常规育种方法相结合,可以大幅度推进甜菜杂种优势利用工作进程,显著缩短育种年限,改变我国目前甜菜生产低产、低糖、品种单一做出一定贡献。
三、本标准的起草过程
2008年以来,在国家现代农业产业技术体系岗位专项资金的支持下,由内蒙古自治区农牧业科学院特色作物研究所进行探索、研究,开展了甜菜组织培养与快速繁殖的研究,经过多年大量的试验,内蒙古自治区农牧业科学院特色作物研究所对试验结果进行了集成与组装,编制形成了“规程”草案。
四、本标准主要技术指标确定的依据
主要技术来源于2008~2018年在内蒙古自治区农科院进行的甜菜不同外植体消毒试验、无菌苗培养试验、甜菜诱导分化培养基选择试验、继代培养基筛选试验和生根培养基筛选试验等试验结果。
五、主要条款的说明
本标准的主要内容包括以下四项:
(1)外植体消毒:甜菜不同外植体(种球、腋芽和花序)的消毒方法,消毒时间,消毒药剂选择。
(2)诱导分化培养基的筛选:诱导培养基中植物生长激素的种类及使用浓度的确定,具体成分为(1L):MS培养基4.75 g,蔗糖30 g,NAA(萘乙酸)0.7 mg,KT(激动素)1.2 mg,琼脂粉7.5 g。
(3)继代培养基的筛选:确定继代培养基中植物生长激素的种类及使用浓度的确定,具体成分为(1L):MS培养基4.75 g,蔗糖30 g,NAA 0.5 mg,KT 0.4 mg,琼脂粉7.5 g。
(4)生根培养基的筛选:通过实验,确定生根培养基中植物生长激素的种类及使用浓度的确定,具体成分为(1L):MS培养基4.75 g,蔗糖30 g,NAA 1.2 mg,琼脂粉7.5 g。
六、重大意见分歧的处理依据和结果
无。
七、采用国际标准和国外先进标准的,说明采标程度,以及国内外同类标准水平的对比情况
无。
八、其他应说明的事项
无。
九、标准草稿征求意见情况汇总表
序号
意 见
提出单位/专家
采纳
不采纳(说明原因)
1
各种激素应该有中文名称 如NAA(萘乙酸)
内蒙古农业大学/史树德
采纳
2
改为:选取健康、籽粒饱满、外观完好的甜菜种球。
内蒙古农业大学/史树德
采纳
3
删除于天气晴朗的上午8:30~10:30
内蒙古农业大学/史树德
采纳
4
改为制备无菌水,配制 75 %酒精,配制 0.1 %升汞,配制80 %次氯酸钠。
内蒙古农业大学/史树德
采纳
5
百菌清浓度?
内蒙古农业大学/史树德
不采纳;本标准里使用的“百菌清”是一种烟剂型农药,修改后已在标准中注明。
6
取回的腋芽剪成小段,改为取回的主枝或者侧枝剪成小段
内蒙古农业大学/史树德
采纳
7
该标准明确了甜菜组织快繁所需各种培养基的成分、种球、腋芽和花序的消毒技术、无菌苗的培养条件以及再生植株的移栽方法。本标准建立了甜菜组培快繁技术,为甜菜遗传转化和快速扩繁提供了新的技术。
内蒙古农牧业科学院/斯钦巴特尔
采纳
8
全文数字和英文字母字体不一致,建议全文统一检查修改。
内蒙古农牧业科学院/郭晓霞
采纳
9
建议该部分改为“4 培养基配制”
蒙古农牧业科学院/郭晓霞
采纳
10
该部分中表述“剪取非老化主枝或者侧枝带回实验室”,对剪取长度是否有要求,若有请交代。
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