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水相生物印迹酶 ? 研究结果表明,采用交联剂完全可以固定印迹 分子的构象,在水相中产生高效催化的生物印 迹酶。利用这种方法已成功地模拟了许多酶 (如酯水解酶、HF水解酶、葡萄糖异构酶等, 有的甚至达到了天然酶的催化效率。
制备生物印迹酶的主要过程为: ? ? ? ? ①首先使蛋白质部分变性,扰乱起始蛋白质 的构象; ②加入印迹分子,使印迹分子与部分变性的 蛋白质充分结合; ③待印迹分子与蛋白质相互作用后,用交联 剂交联印迹的蛋白质; ④经透析等方法除去印迹分子。
? 由于起始蛋白质与印迹分子充分作用后,就 产生了类似于酶的新的活性中心,从而赋予 了新的酶活力。 对这种印迹来说,起始蛋白质既可以是无酶 活力的蛋白质(如牛血清蛋白等,又可以是 具有催化活力的酶,而印迹分子通常是某种 酶的抑制剂、底物修饰物或过渡态类似物等。 ?
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