课题3 分解纤维素的微生物的分离 2.ppt

课题 3 分解纤维素的微生物的分离 学 习 目 标 思 维 脉 络 1 . 简述纤维素酶的种类 和作用。 2 . 从土壤中分离能分解 纤维素的微生物。 ( 重点 难点 ) 3 . 讨论从土壤中分离出 的分解纤维素的微生物 的应用价值。 二 一 三 一、纤维素与纤维素酶 二 一 三 二 一 三 二、纤维素分解菌的筛选与鉴别 二 一 三 二 一 三 三、实验设计和课题延伸 二 一 三 二 一 三 探究点一 探究点二 探究点一 纤维素分解菌筛选 ( 鉴别 ) 的原理 问题导引 刚果红染色法筛选 ( 鉴别 ) 纤维素分解菌的原理是什么 ? 常用的刚 果红染色法有两种 , 各有何优、缺点 ? 据下列实验原理 , 回答有关问题。 探究点一 探究点二 (1) 筛选纤维素分解菌时 , 应向培养基中加入 刚果红 , 此方法叫 刚 果红染色 法 , 该方法可以通过 颜色反应 筛选纤维素分解菌。 (2) 某同学在实验时得到了如下图所示的结果 , 则图中①②③指示 的位置中 , 为纤维素分解菌菌落的是 ③ 。 (3) 刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过 20 年的历史 , 在本课题中给出了两种方法 , 哪种方法操作比较简单 ? 方法二 : 倒平 板时加入刚果红 。 归纳提升 常用的刚果红染色法有两种 , 两种方法的比较如下表。 探究点一 探究点二 方法 操 作 优 点 缺 点 方法 一 先培养 微生 物 , 再 加入刚 果红 显示出的颜 色反应基本 上是纤维素 分解菌的作 用 操作烦琐 , 加入的刚果红溶液会使 菌落之间发生混杂 方法 二 倒平板 时加入 刚果红 操作简便 , 不 存在菌落混 杂的问题 ①由于纤维素粉和琼脂、 土豆汁中 都含有淀粉类物质 , 可使能产生淀 粉酶的微生物出现透明圈较为模 糊的假阳性反应 ; ②有些微生物具 有降解色素的能力 , 长时间培养会 降解刚果红而形成明显的透明圈 , 与纤维素分解菌不易区分 探究点一 探究点二 探究点二 分解纤维素的微生物的分离实验 问题导引 如何从土壤中分离出能分解纤维素的微生物 ? 结合实验原理和教材给出的材料 , 完善下面的实验流程 , 并讨论 回答有关问题。 探究点一 探究点二 实验过程分析 (1) 土壤取样 ①为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌 ? 答案 : 这是因为在纤维素含量丰富的环境 , 通常会聚集较多的分 解纤维素的微生物。 ②如果找不到合适的环境 , 可以将滤纸埋在 土壤 中 , 过一段时间 后会有能分解纤维素的微生物生长。 探究点一 探究点二 (2) 选择培养 纤维素分解菌的选择培养基配方 ( 单位 :g) 纤维 素粉 NaNO 3 Na 2 HPO 4 · 7H 2 O KH 2 PO 4 MgSO 4 · 7H 2 O KCl 酵母膏、 水解酪素 5 1 1.2 0.9 0.5 0.5 各 0.5 将上述物质溶解后 , 用蒸馏水定容到 1 000 mL 探究点一 探究点二 ①该培养基中的主要碳源是 纤维素粉 , 只有能利用它的纤维素分 解菌才能大量生长繁殖。 ②该培养基为 液体 培养基。 ( 根据物理状态 ) ③你能否设计一个对照实验 , 说明选择培养的作用 ? 用牛肉膏蛋白胨液体培养基与该选择培养基作对照 ( 或将该选择 培养基的纤维素粉换成葡萄糖与之对照 ), 在相同条件下接种、培 养 , 并进行以下纤维素分解菌的鉴别实验。与对照组相比若经选择 培养基选择培养后 , 得到的纤维素分解菌的菌落数多 , 即可说明选 择培养的作用 。 ④选择培养的目的是 增加纤维素分解菌的浓度 。 探究点一 探究点二 (3) 鉴别纤维素分解菌 鉴别纤维素分解菌的培养基配方 ①该培养基从物理状态看是 固体 培养基。 ②培养基中的 CMC-Na 是羧甲基纤维素钠 , 它在该培养基中可作 为 碳源 。 CMC-Na/g 5~10 酵母膏 /g 1 KH 2 PO 4 /g 0.25 琼脂 /g 15 土豆汁 /mL 100 将上述物质溶解后 , 用蒸馏水定容到 1 000 m