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HER2免疫组化检测的质量控制苏州大学附属第一医院郭凌川内容提要HER2检测的质量控制和质量保证HER2检测质量的影响因素检测前检测中检测后HER2检测的质量保证内部质保外部质保Ring研究HER2检测的质量控制和质量保证质量体系－定义 质量控制 （QC）用以确保HER2检测结果正确性的内部验证步骤质量保证 （QA）通过与其他实验室检测结果相比较而得到的检测技术评价的方式 （例如，外部控制）Bilous M, et al. Mod Path 2003;16:173–182.质量控制与质量保证有何区别？质控达到和/或维持目标质量在检测中每个步骤均进行样品检查，从而决定是否进行相关改进操作步骤的内部验证每批实验都应进行确保每个检测结果均准确质保旨在改善总体检测操作与其他检测中心相比较质控/质保原则（推荐）内部质量控制a) 染色 严格遵守免疫组化或原位杂交操作步骤 设立对照组:细胞系和组织标本免疫组化评分0/1+, 2+, 3+ 需经原位杂交确定 若对照组检测未能达标，需重新进行实验b) 评分 评价:若正常组织检测为阴性而肿瘤组织检测细胞膜膜染色阳性，则免疫组化检测即以足够乳腺癌：仅浸润性肿瘤不均匀: 选择代表性区域异质性特异区域: 按最高分评分c) 实验室 设立适当对照组d) 检测步骤 难以确定的检测病例1) 重新检测2) 将免疫组化检测结果与原位杂交检测结果对比3) 咨询外部实验室e) 记录 使用标准化检测报告表 记录任何:与标准化标本处理步骤相违背的不当操作难以确定病理诊断的病例持续质量评价对相关从业人员进行教育培训每年重新检测约5%的阳性和阴性病例 参与Ring研究Adapted by permission from Macmillan Publishers Ltd; Bilous M et al. Mod Pathol 2003;16:173─182. ? 2003.质控/质保原则（推荐）内部质量控制a) 染色 严格遵守免疫组化或原位杂交操作步骤 设立对照组:细胞系和组织标本免疫组化评分0/1+, 2+, 3+ ，2+需经原位杂交确定 若对照组检测未能达标，需重新进行实验b) 评分 评价:若正常组织检测为阴性而肿瘤组织检测细胞膜膜染色阳性，则免疫组化检测即以足够胃癌或胃食管交界癌：选择代表性区域不均匀: 选择代表性区域异质性特异区域: 按最高分评分c) 实验室 设立适当对照组d) 检测步骤 难以确定的检测病例1) 重新检测2) 将免疫组化检测结果与原位杂交检测结果对比3) 咨询外部实验室e) 记录 使用标准化检测报告表 记录任何:与标准化标本处理步骤相违背的不当操作难以确定病理诊断的病例持续质量评价对相关从业人员进行教育培训每年重新检测约5%的阳性和阴性病例 参与Ring研究Adapted by permission from Macmillan Publishers Ltd; Bilous M et al. Mod Pathol 2003;16:173─182. ? 2003.HER2检测质量的影响因素影响IHC检测结果之常见问题诸多因素会影响IHC结果的评估标本固定较差1染色不均 标本点状假阳性染色2棕色点状染色为胞质染色而非胞膜染色细胞质染色, IHC 02弥散性非均一性细胞质染色标本边缘假阳性染色1肿瘤标本边缘染色而中心无染色W Hanna供图; Dako供图.影响FISH检测结果之常见问题固定不完全1片状染色;信号较弱或缺失标本制备染色步骤过分固定1持续性自发性荧光;信号较弱或缺失消化封闭不完全2较强自发性荧光；背景亦呈现较强非特异性染色Abbott供图; 2. Ventana供图.影响HER2检测结果之因素取样评分系统组织处理 报告内容固定时间判读标准检测后检测前固定方式使用图像分析检测方法验证 HER2检测偏倚 检测仪器精准度实验条件检测中 实验室步骤对照 检测人员实验试剂抗原修复类型Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007;25:118─145.HER2检测的影响因素：检测前影响HER2检测结果之因素: 检测前取样组织处理固定时间固定方式Pre-analytic检测前HER2检测偏倚Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007; 25:118–145.影响HER2检测结果之因素: 检测前取样原发性乳腺癌最好为手术切除而非活检标本，包含癌旁乳腺组织避免细针穿刺活检取样转移性乳腺癌穿刺活检取样胃癌经内镜活检取样或经手术切除之标本取样检测前HER2检测偏倚HER2检测偏倚Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007; 25:118–145.影响HER2检测结果之因素: 检测前组织处理方式提供新鲜及已定位之标本或切除后迅速经甲醛固定之标本