中药综合检验技术 色谱法概述 色谱分析基础.ppt

4.色谱峰区域宽度： （1）标准差σ： （2）半峰宽W1/2： W1/2=2.355 σ （3）峰宽W： W=4 σ=1.699W1/2 （二）色谱分析常用术语 5．拖尾因子　为了保证色谱分离效果和测量精度，常用拖尾因子用以衡量色谱峰的对称性，用T表示。 6．保留值 从进样到色谱柱后出现待测组分信号极大值所需要的时间为保留时间(tR)，从进样到产生待测组分信号极大值所需要的流动相体积为保留体积（VR）。 6．保留值 (1)死时间（tM）不被固定相吸附或溶解的气体（如空气、甲烷）, 从进样开始至柱后出现浓度最大值所需的时间称为死时间。 (2)保留时间（tR） 被测组分从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔称为该组分的保留时间。 (3)调整保留时间t′R 组分的保留时间与死时间之差称为调整保留时间。 (4)死体积（VM） 由进样器至检测器的流路中，它是进样器至色谱柱间导管的容积、色谱柱中固定相颗粒间间隙、柱出口导管及检测器内腔容积的总和。可以理解为：在死时间内流过的载气的体积。 (5)保留体积（VR） 某组分从进样开始到该组分色谱峰峰顶的保留时间内所通过色谱柱的载气体积。载气的流速越大，保留时间越小，两者之积仍为常数。 (6)调整保留体积v?R 组分的保留体积与死体积之差称为调整保留体积。 (7).相对保留值γi.s： 一定实验条件下组分i与标准物质S的调整保留值之比（也可以是它们的分配系数、容量因子之比）。 7．选择因子：组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比，称为选择因子，用符号?表示。 8．分离度（R）又称分辨率，是指两相邻组分色谱峰的保留时间之差与两组分色谱峰峰宽之和的一半的比值。 在进行定量分析时，为了能获得较好的精密度和准确度，应使R≥1.5。 (三)相平衡参数 1．容量因子 (capacity factor，k)，也称为保留因子或分配比。是指在一定温度、压力下，在两相间达到分配平衡时，组分在固定相与流动相中的质量比，它与调整保留时间的关系： 2．分配系数（K) 山东中医药高等专科学校 Shandong College Of Traditional Chinese Medicine 山东中医药高等专科学校 Shandong College Of Traditional Chinese Medicine 色谱法的产生与发展：色谱法出现于20世纪初，1906年，俄国植物学家茨维特对植物色素进行分离，得到不同颜色的色带，色谱法因此而得名。 无机与分析技术 基础化学教研室 王雷清 色谱分析基础 无机与分析技术 基础化学教研室 王雷清 色谱分析法分类 俄国植物学家茨维特在1906年使用的色谱原型装置，如图。 色谱法是一种分离技术， 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 色谱分析法分类 一、色谱法概念： 色谱法又名层析法，是一种依据物质的物理化学性质的不同（如溶解性、极性、离子交换能力、分子大小等）而进行的分离分析方法。 色谱分析法分类 二、色谱法的分类 （一）按流动相和固定相所处的状态分类 液相色谱法 、气相色谱法 （二）按操作形式分类 柱色谱法、薄层色谱法及纸色谱法 （三）按分离机制分类 吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法 色谱分析法分类 气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱。 色谱分析法分类 液相色谱：流动相为液体（称为淋洗液） 按固定相不同分为：液固色谱和液液色谱 离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。 色谱分析法分类 平面色谱： 薄层色谱和纸色谱 比较简单的色谱方法 色谱分析法分类 色谱法的特点 （1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。 （2） 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。 （3） 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可完成一个试样的分析。 （4） 应用范围广 色谱分析法分类 无机与分析技术 基础化学教研室 王雷清 色谱分离原理 1.按色谱分离机制分类 （1）吸附色谱法 （2）分配色谱法 （3）离子交换色谱法(IEC) （4）分子排阻外色谱法(MEC) 2.按操作形式不同分类 （1）柱色谱法 （2）平面色谱法①薄层色谱法 ②纸色谱法 色谱分析法分类 色谱过程示意图