乙肝两对半标准操作规程POS[学习].pdfVIP

乙肝五项（乳胶法）操作规程POS 1.检测目的 乙型肝炎病毒标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb) 检测。 2.测定原理 HBsAg 检测采用双抗体夹心法原理，试剂含有被事先固定于膜 上测试区（T 区）的抗体。检测时，标本滴入试剂加样处，标本与 预包被的乳胶颗粒（即标记物）结合的HBsAb （即标记抗体）反应， 该结合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，乳胶抗体（标记 抗体）在层析过程中先与标本中的HBsAg 结合，随后结合物会被固 定在T 区膜上的HBsAb 捕获，形成HBsAb 标记抗体-HBsAg-HBsAb 复 合物，从而在T 区形成一条红杠。如为阴性，则T 区没有红杠。 HBsAb 检测采用双抗原夹心法原理，试剂含有事先固定于膜上 测试区（T 区）的HBsAg。检测时，标本滴入试剂加样处，标本与预 包被的乳胶颗粒结合的HBsAg 反应（即标记抗原）反应，该结合物 随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，乳胶抗原（标记抗原）在 层析过程中先与标本中的HBsAb 结合，随后结合物会被固定在T 区 膜上的HBsAg 捕获，形成HBsAg 标记抗原-HBsAb-HBsAg 复合物，从 而在T 区形成一条红杠。如为阴性，则T 区没有红杠。 HBeAg 检测采用双抗体夹心法原理。试剂含有事先固定于膜上 测试区（T 区）的HBeAb。检测时，标本滴入试剂加样处，标本与 预包被的乳胶颗粒结合的HBeAb 反应（即标记抗体）反应，该结合 1 / 6 物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，乳胶抗体（标记抗体） 在层析过程中先与标本中的HBeAg 结合，随后结合物会被固定在T 区膜上的HBeAb 捕获，形成HBeAb 标记抗原-HBeAg-HBeAb 复合物， 从而在T 区形成一条红杠。如为阴性，则T 区没有红杠。 HBeAg、HBcAb 采用竞争抑制法原理，试剂含有事先固定于膜上 测试区（T 区）的抗体。检测时，标本滴入试剂加样处，随之标本 在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体，则同膜上测试 区(T)的单克隆抗体竞争，与预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。 如标本中没有相应的抗体，则预包被在乳胶颗粒上的相应抗原与膜 上测试区(T) 的单克隆抗体全部结合。 阳性标本，测试区(T)将没有 红色条带；阴性标本，测试区(T)会出现明显的红色条带。 3.标本采集 样本采集后应尽快分离血清或血浆以避免溶血。检测进应尽量 使用新鲜的样本。样本若不能及时送检，可在2-8℃冷藏3 天。长期 保存需冷冻于-20 ℃，忌反复冻融。发臭、溶血等异常样本请勿使用。 4.试剂 艾博生物医药有限公司 5.操作步骤 5.1 使用前将试剂板和血清／血浆标本恢复至室温(20～30 ％) 。 从原包装铝箔袋中取出试剂盒(注意：在扣开铝箔前应先恢复至室温)， 在1 小时内应尽快地使用。 2 / 6 5.2 将试剂盒置于干净平坦的台面上，用吸管吸取血清／血浆标 本，逐滴垂直加入于试剂板的五个加样子L 中(每孔2-3 滴) 。 5.3 加样后立刻开始计时，等待红色条带的出现，在15 分钟时 读取测试结果。在20 分钟后读取的结果无效。 6.结果判定 由于前三个项目HBsAg、HBsAb、HBeAg 使用双抗体(原)夹心法 原理，后两个项日HBeAb、HbcAb 使用竞争法原理。因此前一：个 项日与后两个项目判读方法是不同的，请注意区别。 6.l. HBsAg、HBsAb、HbeAg 6.1.1 阳性(+)：两条红色条带出现。一条于测试区(T) 内，另一 条位于质控区(C)。阳性结果表明：标本中含有待测物质。 6.1.2 阴性(-)：质控区(c)出现一条红色条带，在测试区(T) 内无红 色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。 6.1.3 无效：质控区(c)未出现红色条带，表明不正确的操作过程 或试剂盒已经变质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并 用新的试剂盒重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批 号产品，并与当地供应商联系。 6.