生物化学检验技术（2015） 钠、钾、氯检验 2.5.3钠、钾、氯检验.pptx

生物化学检验技术 信阳职业技术学院 董子玉 钠、钾、氯检验 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 3.氯的测定 2.钠、钾的测定 1.标本的采集与处理 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 1.标本的采集与处理 血清、肝素化的抗凝全血、尿液和其它 体液均可作为钠、钾测定的标本 血浆钾比血清钾低0.1～0.2mmol/L 避免使用含钾钠的抗凝剂，若使用ISE法或 比色法测定，则不能使用肝素铵，以免造成 假性升高 避免溶血 尿标本注意防腐 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 2.钾、钠的测定 其他方法 常用方法 参考方法 酶法 钠、钾的检测方 法 3 2 1 火焰光度法（FES) 离子选择电极法（ISE) 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 2.钾、钠的测定 利用火焰，在高温作用下，使钠、钾原子获得能量被激发，不稳定的激发态原子又迅速发射出特有波长的辐射光谱。发射光谱强度直接与钠、钾浓度呈正比。钠的辐射波长为589nm（黄色），钾的辐射波长为766nm（深红色） 火焰光度法 原理 优缺点 优点：快速、准确、精密度高、特异性好、成本低廉。 不足：由于使用了燃气，带来了安全隐患，故临床实验室较少使用。 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 2.钾、钠的测定 是测定钠、钾浓度的常用的方法，通常选用对Na+或K+敏感的玻璃膜电极或用缬氨霉素膜制成的K+电极，硅酸锂做为主要成分的Na+电极离子交换膜 离子选择电极法 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 2.钾、钠的测定 离子选择电极法 定量方法 直接电位法 对标本不经稀释直接进行测定，不受蛋白质和脂肪的影响 间接电位法 标本需经稀释液稀释后进行测定，受蛋白质和脂肪的影响 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 2.钾、钠的测定 酶法 邻-硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG)在钠-依赖性β-半乳糖苷酶水解下生成邻-硝基酚和半乳糖，邻-硝基酚的生成量与Na+浓度呈正比。邻-硝基酚在碱性条件下呈黄色，可在405nm处测定吸光度的升高速率，即可计算Na+的浓度 β-半乳糖苷酶 邻-硝基酚-β-D-半乳糖苷 邻-硝基酚（黄色）+半乳糖 Na+检测原理 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 2.钾、钠的测定 酶法 磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)与ADP在钾-依赖性丙酮酸激酶(PK)催化下，生成丙酮酸和ATP，丙酮酸和NADH在LDH催化下，生成乳酸和NAD+。反应中NADH的消耗量与样品中K+浓度呈成比，故在340nm处监测吸光度下降速率，即可计算K+的含量 K+、PK PEP + ADP 丙酮酸 + ATP LDH 丙酮酸 + NADH + H+ 乳酸 + NAD+ K+检测原理 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 第一节 第二节 第三节 生物化学检验技术 2.钾、钠的测定 酶法 有较好的稳定性，精密度和准确度 与火焰光度法有可比性，同时易于自动化， 可利用全自动分析仪同时对K+、Na+进行 测定，适合急诊及常规分析 评价 体液中水、电解质分布与功能 钠、钾、氯代谢及平衡紊乱 钠、钾、氯检测 第一节 第二节 第三节