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牛乳样品中菌落总数的检测显微镜(油镜的使用)主讲:徐晓燕 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 目录页二一试剂和器材实验目的三实验原理四五操作步骤注意事项 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 实验目的一1、学习并掌握油镜的基本原理和使用方法。2、观察和识别细菌的三种基本形态。 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 试剂和器材二1.试剂 三种细菌样品、香柏油、镜头清洗液2.器材显微镜(B204)、擦镜纸等 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 基本原理三1.增加照明强度 在油镜与载玻片之间加入与玻片的折射率相仿的镜油,使进入物镜的光线不会由折射或反射造成损失,基本上全进入镜头,结果提高了照明强度,使图像更加清晰。 折射率(n)空气1.00 水1.33 香柏油 1.52 玻璃1.55 — 4 — — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 2.增加显微镜的分辨率 分辨率是指显微镜能分辨两点间最小距离的能力。D值愈小则表明分辨力愈强。 D=0.61λ/NA NA=n·sinα/2 λ:光波波长 NA:物镜的数值孔径值 n:介质折射率 α:镜口角(总是小于180°) — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 操作步骤四1.放置标本:将染色的细菌三型玻片置于镜台上。2.找合适的视野: 先用低倍镜寻找合适的视野并将欲观察的部位其移到视野中央。3.转换油镜:将油镜转到工作位置。4.调节聚光器与油镜数值孔径一致 : 将聚光器上升到最高位置,可变光阑开到最大。 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 5.加香柏油:使油镜镜头浸入香柏油中。注意油镜镜头千万不要压在玻片标本上。 6.调焦:转动粗调焦螺旋,再缓慢地提升油镜调焦至物像清晰。注意下降或上升镜筒或载物台绝不可用力过猛。 7.观察: 仔细观察细菌的三种基本形态8.显微镜用毕后的处理: 上升镜筒,取下玻片,清洁油镜 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 棒状杆菌单球菌 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 螺旋菌 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 食品营养与检测专业教学资源库 注意事项五1.油镜工作距离短,故操作时要特别谨慎,切忌用眼 睛对着目镜边观察边下降镜筒,而应从侧面注视。2.调焦时,应特别注意,切勿将粗调节器向反方向(由高向低)转动而损失镜头和玻片。 — 4 — — 4 — 感谢指导 期待合作
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